Метод серийных разведений в плотной питательной среде в принципе не отличается от вышеизложенного метода. Для его осуществления берут ряд пробирок или флаконов с 1,5 см3 МПА, расплавляют, остужают и добавляют по 1,5 см3 соответствующего разведения антибиотика (в бульоне), перемешивают и вносят в чашки Петри. Для контроля в пробирку с агаром вместо антибиотика вносят 1,5 см3 стерильной дистиллированной воды. Чашку делят на секторы, на которые сеют исследуемые культуры. Результаты учитывают через 18-24 часа инкубации в термостате при 37 ˚С. Наименьшая концентрация антибиотика, которая задерживает рост культуры на поверхности агара, и есть МИК антибиотика.
6.4. Е-тест (Epsilometer) – эллипс-тест.
Определение чувствительности микроорганизма с помощью Е-теста проводится аналогично тестированию дискодиффузионным методом. Отличие состоит в том, что вместо диска с антибиотиком используют полоску Е-теста, содержащую градиент концентраций антибиотика от максимальной к минимальной.
|
|
В месте пересечения эллипсовидной зоны подавления роста с полоской Е-теста получают значение минимальной подавляющей концентрации (МПК).
Измеряют в мг/л или мкг/мл.
Несомненным достоинством диффузионных методов является простота тестирования и доступность выполнения в любой бактериологической лаборатории. Однако с учетом высокой стоимости Е-тестов для рутинной работы обычно используют дискодиффузионный метод.
Современные методы определения чувствительности бактерий к химиотерапевтическим препаратам
6.5.1. В настоящее время применяют системы с использованием компьютера, позволяющие автоматически проводить выделение бактерий из исследуемых образцов и определять чувствительность выделенных штаммов к антибиотикам.
Автоматизированные инкубационные системы Baxter и MicroScan с помощью встроенных фотометров отмечают рост или отсутствие роста бактерий через 24 часа после внесения культуры бактерий в лунки микропанелей. Система VITEK позволяет получить результаты через 4-10 часов.
Система Alamar
Система Alamar состоит из панели с лунками, в которые помещают бумажные диски, пропитанные антибиотиками в различных концентрациях и индикаторм. После внесения исследуемого штамма бактерий при наличии их роста, индикатор меняет свой цвет.