1.Определение содержания летучих жирных кислот. Летучие жирные кислоты образуются в мясе в результате дезаминирования аминокислот при гнилостной порче мяса.
При восстановительном дезаминировании образуются карбоновые кислоты и аммиак:
R - CH - COOH + 2H+ ® R – CH2 - COOH + NH3
|
NH2
Кроме того, жирные кислоты могут образовываться и под влиянием некоторых анаэробных микроорганизмов из углеводов мяса.
Установлено, что на ранних стадиях гнилостного разложения в наибольшем количестве образуется уксусная кислота, за ней следует масляная, на более поздних стадиях появляются муравьиная и пропионовая кислоты. Таким образом, накопление этих кислот может служить одним из показателей свежести мяса.
Принцип метода. Количество летучих жирных кислот определяют путем отгонки их с острым паром из навески измельченного мяса после вытеснения их серной кислотой и титрования отгона раствором щелочи. Серная кислота препятствует также отгонке летучих оснований.
|
|
Проведение испытания. Испытание проводят на приборе для перегонки
водяным паром (см. чертеж). Навеску фарша, приготовленного по ГОСТ 7269, массой (25 ± 0,01) г, взвешенную на лабораторных весах помещают в круглодонную колбу 1. Туда же приливают 150 см3 раствора серной кислоты концентрации 20 г/дм3. Содержимое колбы перемешивают и колбу закрывают пробкой 2. Под холодильник 3 подставляют коническую колбу 4 вместимостью 250 см3, на которой отмечают объем 200 см3. Дистиллированную воду в плоскодонной колбе 5 доводят до кипения и паром отгоняют летучие жирные кислоты до тех пор, пока в колбе не соберется 200 см3 дистиллята. Во время отгона колбу 1 с навеской подогревают. Титрование всего объема дистиллята проводят 0,1 моль/дм3 раствором гидроокиси калия (или гидроокиси натрия) в колбе 4 с индикатором (фенолфталеином) до появления неисчезающей в течение 30 с малиновой окраски.
Рис.7. Прибор для отгонки летучих жирных кислот.
Параллельно, при тех же условиях, проводят контрольное испытание для определения расхода щелочи на титрование дистиллята с реактивом без мяса.
Обработка результатов. Количество летучих жирных кислот (X) в миллиграммах гидроокиси калия в 25 г мяса вычисляют по формуле
X = (v - v0) K ´ 5,61,
где v - количество 0,1 моль/дм3 раствора гидроокиси калия (или гидроокиси натрия), израсходованное на титрование 200 см3 дистиллята из мяса, см3;
v0 - количество 0,1 моль/дм3 раствора гидроокиси калия (или гидроокиси натрия), израсходованное на титрование 200 см3 дистиллята контрольного анализа, см3;
|
|
K - поправка к титру 0,1 моль/дм3 раствора гидроокиси калия (или гидроокиси натрия);
5,61 - количество гидроокиси калия, содержащееся в 1 см3 0,1 моль/дм3 раствора, мг;
За окончательный результат испытаний принимают среднее арифметическое двух определений.
Вычисление производят с погрешностью не более 0,01 мг гидроокиси калия.
Мясо считают сомнительно свежим, если в нем содержится летучих жирных кислот от 4 до 9 мг гидроокиси калия, а выше 9 мг – несвежим.
Мясо считают свежим, если в нем содержится летучих жирных кислот до 4 мг гидроокиси калия.
2. Метод определения продуктов первичного распада белков в бульоне.
Сущность метода. Метод основан на осаждении белков нагреванием, образовании в фильтрате комплексов сернокислой меди с продуктами первичного распада белков, выпадающих в осадок.
Порядок выполнения работы следующий. 20 г исследуемого мясного фарша помещают в коническую колбу объемом около 100 мл, заливают 60 мл дистиллированной воды, закрывают часовым стеклом и ставят на 15 мин в кипящую водяную баню. Горячий бульон фильтруют через плотный слой ваты толщиной не менее 0,5 см в пробирку, помещенную в стакан с холодной водой. Если в бульоне остаются хлопья белка, дополнительно фильтруют через фильтровальную бумагу. В пробирку набирают 2 см3 фильтрата, добавляют 3 капли раствора сернокислой меди, концентрации 50 г/дм3. Пробирку встряхивают и ставят в штатив. Через 5 мин. отмечают результаты анализа.
Мясо считают свежим, если при добавлении раствора сернокислой меди бульон остается прозрачным.
Мясо считают сомнительной свежести, если при добавлении раствора сернокислой меди отмечается помутнение бульона, а в бульоне из замороженного мяса - интенсивное помутнение с образованием хлопьев.
Мясо считают несвежим, если при добавлении раствора сернокислой меди наблюдается образование желеобразного осадка, а в бульоне из размороженного мяса - наличие крупных хлопьев.
Появление в бульоне мути и хлопьев обусловлено взаимодействием между медью и первичными продуктами распада белков; образование окрашенного осадка обусловлено взаимодействием также и с продуктами более глубокого распада.
При расхождении результатов органолептического и химического или микроскопического анализа проводят повторный химический анализ на вновь отобранных образцах. Результаты повторного анализа являются окончательными.