Среда | Плоскирева | Эндо | ЭМС | Другие среды |
Род | ||||
Shigella | небольшие (1-1,5 мм в диаметре), бесцветные, слегка выпуклые, с ровным краем и блестящей поверхностью, прозрачные. S. dysenteriae 1 формируют более мелкие и нежные колонии, а на среде Плоскирева растут скудно | На СПА S. sonnei нередко образуют колонии I и II фаз | ||
S. sonnei образуют иногда, кроме описанных (I фаза), и колонии более крупные, плоские, с неровным краем, напоминающие виноградный лист (II фаза) | ||||
Salmonella | размер чаще 2-2,5 мм в диаметре, иногда и 1 мм, слегка выпуклые, с ровным краем и гладкой поверхностью, влажные | |||
бесцветные, мутноватые, уплотненные | обычно прозрачные, слегка розоватые | обычно прозрачные, с небольшим фиолетовым оттенком | на СПА колонии голубоватые, мелкие, прозрачные; на ВСА - черные, с характерным металлическим блеском, среда под колониями прокрашена в черный цвет, колонии S. paratyphi A зеленоватые, светлые, нежные | |
Escherichia | рост значительно подавляется |
| ||
более крупные, чем колонии шигелл и сальмонелл, многообразие по окраске, плотности и форме; могут быть выпуклые или плоские, с ровным или слегка волнистым краем, непрозрачные или полупрозрачные и слегка опалесцирующие, влажные или сухие, иногда слизистые, напоминающие колонии клебсиелл, а также более нежные и прозрачные, похожие на колонии шигелл и сальмонелл; у лактозоположительных штаммов на среде Эндо - темно-красные с металлическим блеском или без него, розовые или с бесцветным ободком и интенсивно красным или розовым центром, а на среде ЭМС - темно-синие с металлическим блеском или розовые; у лактозоотрицательных штаммов - под цвет среды или с розоватым оттенком (на Эндо и ЭМС), а на среде Плоскирева - с желтоватым оттенком | ||||
Citrobacter | более крупные, чем колонии шигелл и сальмонелл, выпуклые; у лактозоотрицательных штаммов - слегка опалесцирующие, в тон среды или с розоватым оттенком; у лактозоположительных - интенсивно розовые или красные с темным центром, но не дающие характерного для эшерихий металлического блеска; рост колоний сопровождается резким неприятным запахом | На ВСА колонии светло-зеленые, коричневые или черные | ||
Klebsiella | большие (диаметр 3 мм), выпуклые, влажные, слизистые, нередко сливающиеся друг с другом или менее крупные, неслизистые, сухие; колонии лактозоположительных штаммов сходны с колониями эшерихий, с металлическим блеском или без него; колонии могут быть красные, розовые, белые, прозрачные, бесцветные, с белым ободком в сочетании с темным или розоватым центром, а на среде Плоскирева могут быть бежевые или желтые | |||
Yersinia | В течение первых суток роста (при 22°C) колонии мелкие (росинки), обычно выпуклые, блестящие, бесцветные, с ровным краем; в течение вторых суток становятся крупнее, при этом колонии Y. enterocolitica (на ЭМС) фиолетовые с металлическим блеском, могут приобретать розовый оттенок, а Y. pseudotuberculosis остаются неокрашенными | На СПА в первые сутки (при 22°C) колонии Y. enterocolitica небольшие, блестящие, прозрачные, голубоватые, мягкой консистенции, у Y. pseudotuberculosis - полупрозрачные, беловато-желтые, при 37°C колонии более крупные, менее прозрачные, с исчерченной поверхностью, волнистым или исчерченным краем, желтоватые | ||
Enterobacter | по размеру, форме и окраске сходные с колониями эшерихий и клебсиелл | |||
Hafniа | полупрозрачные, бесцветные или имеющие оттенок среды, розоватые, сероватые; на среде Плоскирева дают скудный рост и нередко напоминают колонии шигелл | |||
Serratia | бесцветные, по размеру и форме трудно отличимые от колоний шигелл или сальмонелл | на СПА колонии многих штаммов продуцируют пигмент розового, красного или фуксинового цвета | ||
Proteus | 2-3 мм в диаметре, прозрачные и полупрозрачные слегка выпуклые и с желтовато-розовым (перламутровым) оттенком, вокруг колоний желтоватый ореол | P. vulgaris, P. mirabilis, проявляя способность роения, дают сливной рост, другие виды образуют колонии, сходные с колониями сальмонелл или шигелл, колонии P. inconstans весьма сходные с колониями шигелл | на ВСА через 48 часов роста колонии влажные грязно-коричневого цвета, после их снятия на среде остается темно-коричневая редукционная зона | |
Edwardsiella | бесцветные или слегка розоватые (на Эндо), полупрозрачные, сходные с колониями сальмонелл или шигелл | на ВСА колонии темные без металлического блеска и почернения среды под ними; на среде Эт-2 - малинового цвета с черным центром | ||
Erwinia | При 37°C не растут или дают замедленный скудный рост; при 25-27°C (оптимальной температуре культивирования) колонии с разнообразными характеристиками, более всего сходные с колониями эшерихий |
Для получения количественных показателей обсеменения исследуемого материала УПЭ, в случаях их выявления, в отсутствие патогенных энтеробактерий и решения вопроса об этиологической значимости могут быть проведены дозированные посевы из проб материала на пластинчатые среды.
Для жидких субстратов (клинический материал) разведения готовят объемным методом, разводя 0,1-1,0 мл исследуемой пробы в соотношении 1:10 (разведение ) в ИХН. Далее в двух пробирках, содержащих по 9,9 мл того же раствора, последовательно готовят разведения и , перенося по 0,1 субстрата из предыдущего разведения. Всю работу проводят с соблюдением правил асептики, со сменой градуированных пипеток при переходе от предыдущего разведения к последующему. При исследовании испражнений предварительно следует приготовить навеску в пределах от нескольких дециграмм до одного грамма, разведения готовят, как указано ранее. Для количественного учета УПЭ на пластинчатые дифференциально-селективные среды высевают по 0,1 мл из разведений и и тщательно растирают нанесенный на поверхность среды материал. На последующих этапах при подсчете выросших колоний их число умножают на соответствующее разведение (из которого проводили высев на чашку) и на 10, т.к. была высеяна доза 0,1 мл. Например: высев из разведения привел к развитию в чашке 30 колоний, однородных по своим характеристикам и отнесенных к роду Citrobacter. Для определения содержания их в 1 грамме исследованного материала 30 умножают на 1000 и на 10 . Таким образом устанавливают, что в 1 грамме материала содержалось бактерий рода Citrobacter.
Отобранные для дальнейшего изучения колонии пересевают в одну из сред для первичной идентификации. При целенаправленном исследовании на ЭПЭ первичный отбор колоний (не менее 2-3 каждой разновидности) проводят с помощью реакции агглютинации на стекле с использованием поливалентной сыворотки OKA (к большому числу наиболее распространенных сероваров ЭПЭ). Остаток колонии, давшей агглютинацию с указанной сывороткой, отсевают в среду для первичной идентификации и на скошенный агар (для дальнейшего серологического изучения).