Серовар | Антигенная структура | Биохимические свойства | |
S. paratyphi B (S. schottmuelleri) | 1, 4, 5, 12; b; 1, 2 | ацетат D-тартрат | - - |
S. java | 1, 4, 5, 12; b; 1, 2 | ацетат D-тартрат | + + |
S. mission | 6, 7; d; 1, 5 | инозит | - |
S. isangi | 6, 7; d; 1, 5 | инозит | + |
S. choleraesuis | 6, 7; c; 1, 5 | арабиноза трегалоза D-тартрат | - - + |
S. typhisuis | 6, 7; c; 1, 5 | арабиноза трегалоза D-тартрат | + + - |
S. enteritidis var. jena | 1, 9, 12; | глицерин (б-он Штерна) | + |
S. enteritidis var. ratin | 1, 9, 12 | глицерин (б-он Штерна) | - |
Род Escherichia представлен одним видом E. coli, объединяющим все ранее известные биовары, включая Alcalescens - Dispar. Особенность рода состоит в том, что непатогенные разновидности эшерихий являются постоянными обитателями кишечника человека, животных, птиц и широко распространены в природе.
Патогенные эшерихии, входящие в этот же род, не отличаются от непатогенных по морфологическим и культуральным свойствам, поэтому при исследованиях на наличие патогенных эшерихий (включая ЭПЭ) изучению подлежат разнообразные по морфологическим характеристикам колонии эшерихий, выросшие на пластинчатых средах.
|
|
Основные биохимические свойства вида Escherichia coli приведены в табл. 19.
Таблица 19. Основные биохимические свойства бактерий вида E. coli
Тест или субстрат | Биохимические реакции |
Глюкоза (газ) | +, - |
Лактоза | +, -, (+)* |
Сероводород | - |
Мочевина | - |
Цитрат Симонса | - |
Индол | +, - |
Лизиндекарбоксилаза | +, -, (+)* |
Реакция с метиловым красным | + |
Реакция Фогеса-Проскауэра | - |
Малонат натрия | - |
Ацетат натрия | +, (+) |
Желатин | - |
Цитрат Кристенсена | х |
Орнитиндекарбоксилаза | х |
Аргининдигидролаза | х |
Фенилаланиндезаминаза | - |
Подвижность | +, - |
Маннит | + |
Инозит | -, + |
Адонит | -, + |
Сахароза | х |
Арабиноза | х |
Рафиноза | х |
Рамноза | х |
Примечание. * Последовательность обозначений реакций соответствует наблюдаемой частоте.
При исследовании на эшерихии ход анализа различен в зависимости от поставленной задачи (поиск ЭПЭ или возбудителей парентеральных эшерихиозов).
При выделении и идентификации (определение сероваров) ЭПЭ, как уже указывалось ранее, поиск и первичный отбор колоний, выросших на чашках первичного посева, проводят серологическим методом в реакции агглютинации на стекле с использованием поливалентной сыворотки OKA (табл. 20). Оставшуюся часть колонии, давшей положительную реакцию агглютинации с сывороткой OKA, отсевают на скошенный агар и на одну из комбинированных сред для первичной идентификации. Культуры, "подозрительные" на принадлежность к роду Escherichia (по данным комбинированной среды), на следующие сутки повторно проверяют в реакции агглютинации на стекле с поливалентной сывороткой OKA и при положительном результате испытывают с поливалентными сыворотками (OKB, OKC, OKD, OKE) или OK-иммуноглобулинами. При наличии положительной реакции культуру засевают со скошенного агара в питательные среды для воспроизведения тестов минимального дифференцирующего ряда, необходимых (с учетом результатов, полученных на комбинированной среде) для подтверждения принадлежности культуры в роду Escherichia (табл. 7). Тест для определения подвижности ставят не обычным порядком (уколом в столбик полужидкого агара), а в пробирках по Крейджи (до стерилизации в бактериологическую пробирку с полужидким агаром помещают трубочку - отрезок стеклянного дрота длиной 3-4 см). Посев делают в верхний конец трубочки, выступающий над поверхностью агара в пробирке. Это дает возможность одновременно "накопить" материал для исследования H-антигена.
|
|
Таблица 20. Состав поливалентных OK-сывороток для серологической идентификации энтеропатогенных эшерихий
Наименование диагностического препарата | Отдельные OK-сыворотки, входящие в поливалентную смесь |
OKA (антитела к 22 серогруппам) | 018ac:K77, 020:K84, 025:K11, 026:K60, 033:K, 044:K74, 055:K59, 075:K, 086a:K61, 0111ab:K58, 0114:K90, 0119:K69, 0124:K72, 0125:K70, 0126:K71, 0127:K63, 0128abc:K67, 0142:K86, 0143:K, 0144:K, 0151:K-, "408" |
OKB (антитела к 4 серогруппам) | 020:K84, 026:K60, 055:K59, 0111ab:K58 |
OKC (антитела к 7 серогруппам) | 033:K, 086a:K61, 0119:K69, 0125:K70, 0126:K71, 0127:K63, 0128abc:K67 |
OKD (антитела к 9 серогруппам) | 018ac:K77, 025:K11, 044:K74, 075:K, 0114:K90, 0142:K86, 0143:K, 0151:K-, "408" |
OKE (антитела к 5 серогруппам) | 0124:K72, 0142:K86, 0143:K, 0144:K, 0151:K- |
При получении на следующий день результатов (учет дифференциальных биохимических тестов), подтверждающих принадлежность культуры к роду Escherichia, проводят дальнейшую серологическую идентификацию для определения сероваров ЭПЭ (O-, K-, H-антигенов). Для исследования O-, K-антигенов используют суточную культуру на скошенном СПА, для исследования H-антигена с поверхности агара из пробирки Крейджи культуру засевают на скошенный глицериновый агар. Культуры эшерихий, давшие реакцию агглютинации с одной из поливалентных OK-сывороток (OKB, OKC, OKD, OKE) или иммуноглобулинами, испытывают в реакции агглютинации на стекле с отдельными групповыми OK-сыворотками, входящими в данную поливалентную смесь (табл. 20), или OK-иммуноглобулинами.
Полученный ориентировочный положительный результат с отдельной OK-сывороткой необходимо подтвердить в реакции агглютинации на стекле (табл. 21) с OK-иммуноглобулином (живые бактерии) и адсорбированными групповыми и факторными O-сыворотками (бактерии, прогретые при 100°C в течение 30 минут).