Среда для определения индолообразования

 

 

Возможно использование:	а) бульона на триптическом переваре казеина (1,2-1,4% аминного азота);
	б) бульона на триптическом переваре Хоттингера (1,2-1,4% аминного азота);
	в) 2% пептонной воды;
	г) 1% пептонной воды с добавлением 0,3% L-триптофана;
	д) полужидкого агара, приготовленного на бульоне Хоттингера.

 

Приготовление всех названных сред общеизвестно.

 

Среды с аминокислотами - лизином, орнитином и аргинином

 

Состав:	Пептон	-	5 г
	Дрожжевой экстракт	-	3 г
	или
	Аутолизат дрожжей	-	12-15 мл
	Глюкоза	-	1 г
	Бромкрезоловый - пурпурный (1,6% спиртовой раствор)	-	0,6 мл
	Крезоловый красный (0,1% спиртовой раствор)	-	5 мл
	L-аминокислота	-	10 г
	или
	DL-аминокислота	-	20 г

 

Указанный в оригинальной прописи индикатор pH может быть заменен на бромтимоловый синий (1 мл 1,6% спиртового раствора).

Вместо дрожжевого экстракта или аутолизата дрожжей можно брать 400 мл мясной воды, соответственно уменьшив объем дистиллированной воды до 600 мл.

Приготовление: в воде растворяют белковую питательную основу и глюкозу. Устанавливают pH 6,0-6,1. Затем среду делят на 4 равные части. В каждую из трех порций вносят одну из аминокислот (лизин, орнитин или аргинин) в количестве, зависящем от кристаллизационной формы реактива (L или DL). В последнюю порцию питательной основы аминокислот не добавляют, оставляя ее в качестве контрольной. Среды кипятят 5-10 минут и вновь устанавливают pH 6,0-6,1. Во все порции вносят раствор индикатора, перемешивают, разливают в агглютинационные пробирки по 2-3 мл. Стерилизуют при 110°C 30 минут.

 

Среды с органическими кислотами: D-, L- и i-тартрат, мукат

 

Состав:		-
Основа.	Пептон	-	10 г
	Натрий гидроокись (NaOH) 0,1 N раствор	-	3,5 мл
	Бромтимоловый синий (0,2% водный раствор)	-	12 мл
	Вода дистиллированная	-	1000 мл
Органические кислоты.
	D-Тартрат (правовращающая соль винной кислоты)	-	10 г
	L-Тартрат (левовращающая соль винной кислоты)	-	5 г
	i- (или мезо)-Тартрат (оптически инертная соль винной кислоты)	-	5 г
	Мукат	-	10 г

 

Приготовление: готовят основу среды, стерилизуют при 120°C 15 минут, добавляют одну из органических кислот, устанавливают pH 7,4, асептически разливают в стерильные пробирки по 5-6 мл и стерилизуют текучим паром 20 минут.

Готовить среду можно иначе: к указанной основе присоединить одну из органических кислот, установить pH 7,4, разлить в пробирки и стерилизовать при 112°C 20 минут.

 

Глицерино-фуксиновый бульон Штерна

 

Состав:	Бульон Хоттингера стерильный, pH 8,0	-	1000 мл
	Фуксин основной, насыщенный спиртовой раствор (10%)	-	2,5 мл
	Натрий сульфит  (10% водный раствор)	-	16,6 мл
	Глицерин нейтральный	-	10 мл

 

Приготовление: к бульону добавляют спиртовой раствор фуксина, свежеприготовленный 10-% водный раствор сульфита натрия и глицерин, хорошо смешивают, разливают в пробирки по 6-7 мл, стерилизуют при 112°C 15 минут. Хранить среду можно в холодильнике не более 14 дней.