2020-06-29
104
Метод абсолютных (предельных) концентраций заключается в детекции ингибирования роста МБТ на питательных средах, содержащих ПТЛС.
Метод пропорций заключается в определении соотношения числа колоний, выросших на среде, содержащей ПТЛС, и числа колоний в контрольной пробирке, не содержащей ПТЛС. Это соотношение является отражением пропорции резистентных бактерий в популяции. Метод позволяет количественно оценить степень резистентности штамма МБТ, однако широкое применение его в классическом варианте затруднено вследствие большой трудоемкости. Определение лекарственной чувствительности микобактерий методом пропорций может проводиться с использованием автоматизированных систем.
В основу работы автоматизированных систем для ускоренной детекции микобактерий и определения лекарственной чувствительности положен принцип культивирования микобактерий в жидкой питательной среде. Интенсивность роста бактерий в автоматизированных системах определяется флуориметрической детекцией содержания О2 в культуральной среде (ВАСТЕС MGIT 960) или колориметрической детекцией продукции СО2 растущими в среде микроорганизмами (BacT/Alert 3D).
Молекулярно-генетические методы основаны на детекции мутаций в геноме микобактерий, ассоциированных с устойчивостью к ПТЛС (GeneXpert, LPA).
Результаты лабораторных исследований всегда следует сопоставлять с клиническими данными, а любой диагностический тест при необходимости следует повторять. Скудный рост при посеве мокроты (менее 5 колоний) слабо коррелирует с клиническим прогнозом; его интерпретация требует осторожности, особенно если подобный результат посева был получен однократно. Однако стойкие положительные результаты посевов или любой положительный результат в условиях ухудшения клинических данных следует рассматривать как достоверные.
Большинство микобактерий, выделенных от больных в странах со значительной распространенностью ТБ, – М. tuberculosis. Частота обнаружения нетуберкулезных микобактерий (НТМ) существенно варьирует в разных странах и более характерна для пациентов, инфицированных ВИЧ. Если нет подтверждения принадлежности к МБТ выделенного штамма микобактерий, обладающего фенотипической устойчивостью к ПТЛС первого ряда, то может иметь место не ЛУ-ТБ, а инфицирование НТМ. Лечение таких заболеваний существенно отличается от химиотерапии ЛУ-ТБ или МЛУ-ТБ. Лаборатории, проводящие бактериологическую диагностику ТБ, должны проводить как минимум ниациновый и нитратредуктазный тесты (оба эти теста положительны для большинства штаммов М. tuberculosis), либо следует проводить не менее двух тестов в соответствии с международными рекомендациями. В настоящее время рекомендуется использование молекулярных методов идентификации, которые являются наиболее точными.
В каждой лаборатории должны быть разработаны программы всеобъемлющего контроля и гарантии качества для получения точных, надежных и воспроизводимых результатов.
Процедуры внутреннего контроля качества должны проводиться при каждом тестировании для обеспечения уверенности в правильности его результата. Внешний контроль качества предусматривает процедуры, выполняемые другой организацией, способной проверить точность результатов тестирования. Гарантия качества предусматривает контроль всей процедуры тестирования, охватывающей все этапы – от сбора мокроты до сообщения результатов исследования в лечебное учреждение.
