Влияние химических веществ на спермии

Готовят несколько раздавленных капель спермы и определяют активность спермиев. Под покровное стекло наносят одну каплю 2% раствора соды, 70° спирта, раствора марганцовокислого калия 1:5000, 1%-ного раствора лизола, раствора фурациллина 1:5000. Для изучения влияния йода на спермии вокруг капли спермы наносят настойку йода в виде кольца и, не покрывая покровным стеклом, просматривают под микроскопом.

При внесении в сперму 70° спирта, растворов: соды, лизола, марганцовокислого калия и фурациллина, наступает гибель спермиев через 1-2 минуты. Из настойки йода улетучивается свободный йод, который вызывает быструю гибель спермиев, при этом сперма окрашивается в желтый цвет. 146

Определение процента патологических форм спермиев

Микроскопическое исследование спермы показывает, что среди нормальных спермиев всегда находится некоторое количество патологических (уродливых) форм. Если это количество выше допускаемых норм, то данное явление называется тератоспермией, Патологические формы спермиев разделяют на две основные группы:

-спермии с изменением формы и величины головки -гигантские, карликовые, двух-трехголовые, с круглой, грушевидной головкой, безголовые и другие;

-спермии с изменениями формы хвоста -искривленной или закрученной частью хвоста, с двумя-тремя хвостами, с утолщением в области шейки, тела, хвоста в виде протоплазматической капли (незрелые, молодые спермии).

Большое количество патологических спермиев свидетельствует о вредном влиянии патологически измененных секретов придаточных половых желез и мочеполовых путей или указывает на нарушение правил получения и хранения спермы.

Вкачестве конкретных причин образования уродливых форм спермиев отмечаются:

Воспаление семенника и придатка (гигантские и карликовые спермии).

Длительные промежутки между коитусами влекут к старению и распаду спермиев в придатке (отдельные головки, хвостики).

Половое истощение производителя в следствие большой половой нагрузки или недостаточного кормления (спермии с протоплазматическими капельками в области шейки, тела и хвоста), чем ближе к головке расположена капелька, тем моложе спермии.

Большое значение в образовании патологических форм спермиев придается нарушению терморегулирующей функции мошонки.

Подсчет патологических спермиев производят в окрашенном мазке спермы. Для уменьшения концентрации спермиев, что важно для удобства подсчета в мазке, необходимо сперму предварительно разбавить 1% раствором хлористого натрия. Сперму барана разбавляют в 20-30, быков в 10-15 раз. Сперму жеребца и хряка разбавляют в 2-3 раза.

На предметное стекло наносят каплю спермы и шлифованным стеклом делают тонкий мазок. Высушенный мазок кладут на стеклянную подставку и увлажняют на 1-2 мин 96°спиртом, который затем удаляют дистиллированной водой. Затем на мазок наносят 5% водный раствор фуксина и красят в течение 3-5 минут. Краску смывают дистиллированной водой, мазок высушивают 147

фильтровальной бумагой и микроскопируют при увеличении в 400-600 раз. Передвигая мазок, в нем подсчитывают 500 спермиев, учитывая отдельно нормальные и патологические. Процент патологических спермиев вычисляют по формуле:

где П -число сосчитанных патологических спермиев.

Для ускорения работы пользуются лейкоцитарным счетчиком.

Чем меньше в эякуляте производителя патологических спермиев, тем выше оплодотворяющая способность спермы. Количество патологических спермиев не должно превышать у барана -14, быка -18, жеребца и хряка -20 процентов. Сперма с большим процентом патологических спермиев обладает низкой оплодотворяющей способностью.

А.А. Рубенков предложил метод одновременного подсчета нормальных и патологических спермиев в счетной камере. Предварительно их окрашивают в эритроцитарном смесителе заранее приготовленной краской, в состав которой входят: фуксин-0,1г, аэурэозин по Гимза (аэур-0,8 г, эозин-3,0 г) -0,02, кристаллическая карболовая кислота -0,2, глицерин чистый-0,4 г, спирт-ректификат 96°-2 мл, 1% раствор химически чистого хлористого натрия на дистиллированной воде -100 мл. Подсчет спермиев проводят так же, как и при определении концентрации, в 5 больших квадратах (80 маленьких) при увеличении в 400 раз. Результаты подсчета позволяют установить концентрацию спермиев в сперме, определить процент патологических спермиев и установить коэффициент отношения нормальных спермиев к патологическим. Если он оказался менее 3, то сперму бракуют.