2020-07-12
369
Категорически запрещается оттаивать гранулы при комнатной температуре или в одном флаконе нескольких гранул. После микроскопии сперма должна быть использована для осеменения коров в течение 15 мин, с момента оттаивания.
При микроскопии разбавленной спермы необходимо пользоваться обогревательным электростоликом. Температура в нем должна быть в пределах +38+42 °С. На слегка подогретое на электростолике предметное стекло наносят каплю спермы и покрывают её покровным стеклом. Каплю нужно наносить не слишком маленькую и не слишком большую. Сперма должна быть равномерно распределена под покровным стеклом без пустых мест и пузырьков воздуха.
При исследовании раздавленной капли увеличение микроскопа должно быть в пределах 140-300 раз. Лучшая видимость спермиев наблюдается при слегка затемненном поле зрения.
Различают следующие виды движения спермиев: прямолинейное поступательное (нормальное) движение спермиев характеризуется правильным линейным перемещением по направлению продольной оси, круговое (манежное) движение -спермии вращаются вокруг своей головки или по небольшому кругу, радиус которого примерно равен длине спермиев. Круговое или манежное движение спермиев обозначается буквой «М». Колебательное движение -спермии конвульсионно вздрагивают, отмечается слабое движение хвоста, не приводящее к перемещению спермиев вперед. Колебательное движение -признак неполноценности и наступающей гибели спермиев. Колебательное движение спермиев обозначается буквой «К».
Когда все спермии мертвые, такое явление носит название некроспермия и обозначается буквой «Н».
Соотношение между спермиями с прямолинейно поступательным движением и определяет качество спермы.
Активность (подвижность) спермиев оценивается по десятибалльной системе: если все спермии, видимые в поле зрения микроскопа, имеет прямолинейное поступательное движение (т.е. 100%), то ставят 10 баллов; 90% -9 баллов, 80% -8 баллов и т.д.
Практически определяют, сколько спермиев мертвых и с патологическим видом движения приходится на каждый десяток спермиев. Если один -9 баллов, два -8 баллов и т.д.
Если один спермий с прямолинейно-поступательным движением приходится на несколько десятков неактивных (мертвых, с манежным и колебательным движениями), активность обозначается буквой «Е» (единичные). При определении активности спермы на пунктах искусственного осеменения техники допускают ряд ошибок: 137
-не соблюдается температурный режим +38°-42 °С. Если температура ниже +38°С, то спермии, хранящиеся при температуре 0°Сили -196°С, неспособны полностью выйти из состояния анабиоза и остаются неподвижными, если температура выше + 42°С, то белки спермиев свертываются и спермии гибнут;
-проверяют активность спермиев в выпуклой (висячей) капле, т.е. спермиев, находящихся на поверхности, а не всех;
-иногда техники по искусственному осеменению проводят определение активности спермы при увеличении микроскопа в 400-600 раз, что недопустимо, так как при этом просматриваются единицы спермиев, чаще только мертвые или с патологическими формами движения.
Густоту и активность обозначают двумя знаками. Пример: Г-9 -сперма густая, имеет 90% активных с прямолинейно -поступательным движением спермиев.
Спермии в отдельных, особенно густых эякулятах, в момент эякуляции не успевают полностью выйти из состояния неподвижности и проявляют при этом слабое движение. Такую сперму надо проверять после добавления к ней 2,8%-ного раствора лимонно-кислого натрия (трехзамещенного, пятиводного), подогретого до +38°-42°С. Для этого на предметное стекло наносят 2 капли раствора и каплю спермы, накрывают покровным стеклом и в месте слияния этих капель определяют активность спермиев.
Для ежедневного контроля качества отправляемой с племпредприятия разбавленной спермы от каждого быка и барана оставляют пробу объемом в 0,5 -1 мл, а от хряка и жеребца пробу спермы с объемом в 20 мл и хранят принятым на предприятии способом.
Активность спермиев в оставленных для контроля пробах спермы оценивают один раз в сутки, в одно и то же время. Это дает возможность контролировать качество отправляемой на пункты спермы в рекомендованный период ее использования для искусственного осеменения животных. Вслучаях преждевременного снижения активности спермиев ниже допустимой нормы принимают немедленные меры к замене спермы. Этот метод контроля качества спермы каждого используемого производителя является обязательным на племпредприятиях.
Минимальным показателем свежевзятой спермы, допускаемой к разбавлению искусственными средами является: 138
Разбавленная сперма, сохраняемая при температуре, близкой к 0°С, и имеющая в течение трех суток хранения оценку не ниже 7 баллов, пригодна к осеменению.
Замороженную сперму используют после оттаивания при подвижности спермиев не ниже 4 баллов.
Определение концентрации спермиев
Исследование проводится каждый раз свежеполученной спермы и после ее разбавления.
Концентрация спермы -это насыщенность спермы спермиями. Она выражается количеством спермиев в 1 мл в миллиардах.
Концентрация условно обозначается буквой -«К» или «С».
Концентрацию спермиев определяют подсчетом в счетной камере Горяева, при помощи фотоэлектроколориметра (ФЭК-м), или при помощи колориметра по стандарту (сперму жеребца и хряка), или используют специальный прибор целоскоп.
Рис. 50. 1 -сетка счетной камеры Горяева; 2 -техника подсчета спермиев в одном большом квадрате (см. увеличенный квадрат). 139
