2020-07-12
320
Применяемые разбавители должны:
1) соответствовать осмотическому давлению спермы;
2) создавать условия изотонии для спермиев;
3) способствовать сохранению электрического заряда спермиев;
4) понижать набухание коллоидов и сохранять их оболочку.
5) снижать активность антител спермиев, губительно влияющих на половые органы самок;
6) выводить из плазмы спермы кальций, сокращающий продолжительность жизни спермиев;
7) защищать спермии от вредного действия микроорганизмов.
Включение в состав разбавителей соли многовалентных металлов (кальция, олова, свинца, железа и пр.) не допускается, так как они вредно действуют на спермии, снимая с них электрический заряд.
Доброкачественный разбавитель должен обеспечивать длительную переживаемость спермиев и сохранение ими оплодотворяющей способности.
Следует обращать особое внимание на то, чтобы реактивы, употребляемые для приготовления разбавителей, были высокого качества и хранились в сухом месте в хорошо закрытых банках. Отсыревшие реактивы употреблять нельзя, так как количество поглощенной ими воды нельзя точно учесть. Кроме того, в отсыревших сахарах быстро развивается микрофлора, которая вызывает разложение сахаров, сопровождающееся образованием вредных для спермиев продуктов распада.
Некоторые соли, употребляемые для разбавителей, могут содержать различные количества так называемой кристаллизационной воды, которая при неправильном хранении (в плохо закрытой банке, находящейся в очень сухом месте) может частично испаряться. Наличие разрушенных, побелевших и потерявших прозрачность кристаллов свидетельствует о частичной кристаллизации воды.
Следует обращать особое внимание на состав цитрата натрия, часто употребляемого для приготовления разбавителей. Для разбавителей можно употреблять только трехзамещенный цитрат натрия, имеющий солоновато-щелочной вкус. Двухзамещенный цитрат натрия (с едким кислым вкусом) употреблять нельзя. По 155
формуле проставленной на этикетке банки с солью, убедиться, что число частиц кристаллизационной воды в данной соли соответствует указанному в рецепте разбавителю.
Антибиотики, вводимые в сперму, как правило, оказывают положительное влияние на переживаемость спермиев. Однако некоторые серии пенициллина и стрептомицина понижают жизнеспособность спермиев, поэтому серию антибиотиков перед применением необходимо проверять на наличие токсичных свойств.
Состав разбавителя должен соответствовать характерным особенностям спермы данного вида животных. Сахара, а также лецитин, вводимый с желтком, являются для спермиев энергетическим материалом, а поэтому они входят в состав большинства разбавителей.
Сцелью окончательной проверки качества приготовленного таким образом разбавителя проводят его биологическую пробу. Сравнивают переживаемость спермиев наилучшим разбавителем будет тот, в котором спермии живут дольше всего.
Какая же степень разбавления может быть лучшей?
Перед разбавлением эякулята нужно знать активность и концентрацию спермиев. Эти показатели должны удовлетворять требованиям инструкции, поскольку являются основой для определения степени разбавления. Степень разбавления зависит также от количества доз и других условий. Эякулят разбавляют, добавляя по частям необходимое количество разбавителя и тщательно перемешивая жидкость. Обычно сперму быка разбавляют в 10 (1:9) -15 (1:14) раз. Внекоторых странах разбавляют сперму 1:20:50, -1:25. Сперму быка 1:100 и даже 1:200. Различие в степени разбавления объясняется разным подходом к определению количества спермиев, необходимого для оплодотворения. Одни авторы считают, что в дозе для осеменения одной коровы должно быть минимум 10-15 млн. спермиев, другие 25-30 млн., с ППД4 балла (40%).
Сперму барана разбавляют в 2 (1:1) -4 (1:3) раза с концентрацией в дозе не менее 80 млн. спермиев.
Сперму хряка разбавляют в 2 (1:1) -10 (1:9) раз с концентрацией в дозе не менее 3 млрд. спермиев через 30-60 мин после взятия и определения ее качества.
Сперму жеребца разбавляют в 4 (1:3) раза с концентрацией в дозе не менее 3 млрд. спермиев.
Для разбавления спермы применяют синтетические среды. Всостав которых входят сахара, соли, яичный желток, санирующие вещества, глицерин и дистиллированная вода. 156
Какое биологическое значение каждого компонента?
Вкачестве основы синтетической среды используют раствор неэлектролита (глюкоза, лактоза, сахароза, раффиноза):
1) сахара нейтрализуют вредное действие на спермии электролитов, т.е. защищают их от снятия электрического заряда (не допускают агглютинации). Наряду с этим сахара используются спермиями для дыхания и фруктолиза;
2) натрий лимоннокислый, трехзамещенный, пятиводный (цитрат) защищает спермии от самоотравления кислыми продуктами распада и создает буферность среды;
3) желток куриного яйца, в котором содержится до 7% лецитина -жироподобного вещества.
При разбавлении спермы средой с желтком он смягчает температурный шок спермиев при охлаждении спермы и обладает буферными свойствами;
4) в качестве дополнительных компонентов для синтетических сред используют сульфаниламид (белый стрептоцид), антибиотики (пенициллин, стрептомицин), а также глицерин. Сульфаниламид и антибиотики (спермосан -3) вводят в среду для предупреждения развития микроорганизмов, которые попадают в сперму;
5) глицерин используют в синтетических средах при замораживании спермы. Вприсутствии глицерина замерзание воды в синтетической среде происходит без образования крупных кристаллов, которые могут повреждать спермии.
Для разбавления и хранения спермы быка применяют следующие синтетические среды:
Для хранения спермы при температуре 2-4°С -
