2020-07-12
256
Глюкоза медицинская безводная, г 3,0
Натрий лимоннокислотный,
трехзамещенный, пятиводный, г 1,4
Желток куриного яйца, мл 20,0
Спермосан-3, тыс.ед. 75-90
Вода дистиллированная, мл 100,0
Для разбавления и замораживания спермы быка
в форме гранул
Лактоза, г 11,5
Желток куринного яица, мл 20,0
Глицерин, мл 5,0
Спермосан-3, тыс. ед. 50,0
Вода дистиллированная 100,0 157
В полипропиленовых соломинках
Лактоза, г 80,5
Фруктоза, г 12,0
Раффиноза пятиводная, г 19,5
Магний сернокислый, г 0,1
Глицерин, мл 50,0
Спермосан-3, тыс. ед. 500-700
Желток куриных яиц, мл 200,0
Вода дистиллированная, мл 1000,0
В облицованных гранулах
Среда № 1
11%-ный раствор лактозы или сахарозы, мл 63,0
Желток куриный яиц, мл 30,0
Глицерин, мл 7,0
Среда № 2
Лактоза или сахароза, г 6,0
Натрий лимоннокислый, трехзамещенный,
пятиводный, г 1,4
Глицерин, мл 5,0
Вода дистиллированная, мл 100,0
Синтетические среды готовят перед их применением. Среды применяют также из сухих заготовок, выпускаемых медицинской промышленностью, в состав которых входят все указанные выше компоненты.
Для приготовления синтетической среды в чистую, стерильную химическую колбу, наливают прокипяченную дистиллированную воду в необходимом объеме. На аналитических весах точно отвешивают, согласно рецепту, необходимые компоненты, кроме спермосана, глицерина и желтка, и высыпают их в колбу с водой. Размешивают компоненты в воде до полного их растворения. Затем среду стерилизуют на водяной бане 5-10 мин с момента закипания в ней воды, охлаждают до 35-40°Си добавляют спермосан, желток или глицерин. Яйца перед извлечением желтков тщательно моют, насухо вытирают марлевой салфеткой и обеззараживают скорлупу спиртовым тампоном (70%) или ультрафиолетовыми лучами в настольной бактерицидной камере в течение 10-15 мин. Стерильным скальпелем или пинцетом яйцо раскалывают пополам и сливают белок в чашку. Желток осторожно переносят на стерильный лист фильтрованной бумаги. Чтобы снять остатки белка, фильтрованную бумагу с одного конца несколько приподнимают и скатывают желток к его краю. После этого 158
прокалывают оболочку желтка стерильным скальпелем и, слегка сжимая фильтр снаружи, сливают желток в стерильную мензурку. Необходимое количество желтка вносят в колбу с растворенными в ней компонентами и тщательно размешивают. Один желток куриного яйца имеет массу 10-20 г.
Разбавители необходимо готовить при соблюдении правил строгой стерильности в работе. Весы, посуда (обязательно стеклянная), стол должны быть стерильны и обеззараженные. Загрязненную посуду, в которой находились желток, разбавитель или сперма, выдерживают в течение суток в хромовой смеси (1 кг двухромовокислого калия добавляют в 10 л дистилированной воды и осторожно добавляют раствор серной кислоты). Новую посуду после мытья выдерживают 24 часа в растворе соляной кислоты.
