2014-02-04
941
Измерение размеров структур
Морфометрия
Заключение среза
Жир - судан Ш - оранжевый
Специальные
Называются - оксифильными или ацидофильными
Кислые - структуры ими окрашивающиеся
Фиолетовый цвет)
Основные - структуры ими окрашивающиеся
Окрашивание среза
красители:
называют базофильными (ядро – гематоксилином – в
(цитоплазма – эозином – розовый цвет)
эластические волокна - орсеином- коричневые
нервная ткань - соли серебра – черная
(импрегнация)
задачи:
- сохранение среза, достигается:
- изоляция от внешней среды
- удаление воды (спирты)
реализация:
- капля канадского (пихтового) бальзама
- покровное стекло
Виды микропрепаратов:
1. гистологические срезы тканей органов
2. мазки (кровь человека)
3. отпечатки (с опухоли)
4. пленки (РСТ)
- метод определения числа и размеров структур
Разновидности:
1. ручная морфометрия
|
|
|
2. автоматизированная морфометрия
Виды морфометрических исследований:
1. подсчет индексов
2. измерение размеров структур
Индексы:
а. митотический индекс (ИМ) - число митозов на 100 (1000) клеток
б. индекс меченых ядер (ИМЯ)– при радиоавтографии – % клеток, включивших исследуемое вещество, меченое радиоизотопной меткой
г. статмокинетический индекс (СКИ) - накопление митозов в течение определенного времени после разрушения веретена деления (колхицин)
в. индекс апоптоза – частоты гибели клеток
1. окулярной микролинейкой (или окуляр-микрометра)
- позволяет получать абсолютные значения размеров
структур
- в мкм
2. морфометрических сеток
- позволяет определять относительные показатели –
долю объема, занимаемую структурой в срезе
- в %
Состоят из трех частей:
1. воспринимающая часть - сканирующий микроскоп
2. регистрация сигнала – фотометрический (ФЭУ) или видеокамера
3. ЭВМ (электронно-вычислительная машина) – цифровые массивы или гистограммы распределения изучаемого признака.
Задачи:
1. Морфометрическая - оценка морфометрических показателей (количество объектов в определенной площади среза, размеры объектов, отношения показателей). Регистрация сигнала - видеокамера.
2. Денситометрическая - оценка количества вещества в структуре (содержания ДНК в ядре клетки и т.д.). Регистрация сигнала – фотоэлектронный умножитель.
Пример морфометрической задачи - изучение ядерно-цитоплазматического отношения.
Ядерно-цитоплазматическое отношение –
- относительный показатель
- отношение объема (размера) ядра клетки к объему
(размеру) ее цитоплазмы
|
|
|
- является величиной постоянной (константой) для
каждого вида ткани
- константа достигается после окончания процесса
дробления в эмбриогенезе (процесс дробления
осуществляется до достижения клетками данной
ткани определенного ядерно-цитоплазматического
отношения, после чего начинается деление клеток
путем митоза)
- анализ показателя возможен только в пределах
одного вида клеток – т.е. невозможно сравнивать между собой лимфоциты и гепатоциты
Задачи исследования ядерно-цитоплазматического отношения:
1. оценка константы данной ткани
- лимфоциты – высокое ядерно-цитоплазма
тическое отношение (приближается к единице – малые лимфоциты – 0,9; средние – 0,7)
- гепатоциты – низкое ядерно-цитоплазматическое
отношение (0,45-0,55)
2. оценка функционального состояния клеток одной ткани
а. нормофункция - ядерно-цитоплазматическое
отношение, характерное для данной ткани,
константа – так в щитовидной железе тироциты
стенки фолликулов – однослойный кубический
эпителий
б. гиперфункция - сопровождается клеточной
гипертрофией – увеличением клеточных разме- ров за счет объема цитоплазмы, т.к. не происходит
изменений количества ДНК в ядре, а значит и
его размеров. Т.о. при гиперфункции ядерно-
цитоплазматическое отношение снижается,
становится более низким.
в. гипофункция - сопровождается клеточной
гипотрофией - атрофией - уменьшением
размеров клеток. При этом ядерно-цитоплаз- матическое отношение увеличивается.
Т.о. увеличение ядерно-цитоплазматического отноше-
ния в ткани свидетельствует о развитии гипофункции, а уменьшение - о
гиперфункции ее клеток.
