Для этого применяют стандартный белок – альбумин сыворотки крови. Из 10% стандартного раствора альбумина в 4 пробирках готовят растворы белка как показано в таблице.
№ пробирки | Стандартный 10% р-р альбумина, мл | 0,9% раствор хлорида натрия, мл | Концентрация белка, г/л |
0,4 | 0,6 | ||
0,6 | 0,4 | ||
0,8 | 0,2 | ||
1,0 | – |
Из каждой пробирки берут по 0,1 мл раствора, добавляют к нему 5,0 мл биуретового реактива. Через 30 мин. измеряют экстинкцию на ФЭКе против контрольного раствора (0,1 мл 0,9% раствора хлорида натрия и 5 мл биуретового реактива).
Полученные значения откладывают на оси ординат, а концентрацию белка (в г/л) на оси абсцисс.
Фотоэлектроколориметр
Для измерения оптической плотности или светопропускания жидких растворов по отношению к растворителю или стандартному раствору предназначен фотоэлектрический колориметр (ФЭК).
В основу работы этого прибора положен принцип уравнения интенсивности двух световых пучков, проходящих через оптические среды, при помощи переменной щелевой диафрагмы.
|
|
Световые лучи от лампы, отразившись от зеркал, проходят через светофильтры, кюветы и попадают на фотоэлементы, которые подключены к гальванометру. Так что при равенстве интенсивности падающих на фотоэлементы световых пучков стрелка гальванометра стоит на нуле.
При вращении барабана диафрагма, связанная с ним, меняет свою ширину и тем самым величину светового потока, падающего на фотоэлемент.
Фотометрически нейтральный клин служит для ослабления светового потока, падающего на фотоэлемент.
Способ измерения.
1.В пучок света помещают кюветы с контрольным раствором.
2.Вращением ручки круговых фотометрических клиньев устанавливают стрелку гальванометра на нуль.
3.Затем в пучок света вводится кювета с исследуемым раствором, при этом стрелка гальванометра отклоняется от нулевого положения. Снимается показание.
4.Прибор после окончания работы выключить. Осторожно промыть кюветы.