Метод двукратных серийных разведений в плотной питательной среде

Принцип опыта тот же, что и при определении чувствительности микроорганизмов к антибактериальным химиопрепаратам в жидкой питательной среде.

Перед постановкой опыта агар расплавляют в водяной бане и охлаждают до 50-60 º С.

Готовят двукратные разведения антибактериального химиопрепарата, после чего вносят по 1 мл каждого разведения в пробирку, содержащую 4 мл агарированной расплавленной и охлажденной среды.

Затем пробирки скашивают для застывания агара, а на поверхность плотной среды петлёй засевают взвесь тест-культуры.

Для постановки опыта в чашках Петри берут 1 объем, содержащий определённое разведение препарата и 9 объемов расплавленного и остуженного агара, тщательно перемешивают в пробирках и выливают в чашку Петри. В контрольную пробирку с агаром вместо раствора антибактериального химиопрепарата вносят 1 объем стерильной дистиллированной воды. Приготовленные таким образом чашки, каждая из которых содержит определенную концентрацию препарата, делят на секторы, на каждый из которых засевают испытуемый штамм. Посев делают петлёй или пастеровской пипеткой.

Для посева часто пользуются также специальным штампом-репликотором, позволяющим нанести на поверхность агара одновременно 25-32 испытуемые культуры. Посевы инкубируют в термостате при t-37ºС в течение 18-24 часов, после чего учитывают результаты.

За МПК препарата для данного штамма принимают ту, при которой отсутствуют признаки роста на поверхности агара (или вместо бляшки имеется рост единичных колоний).