Мочевая кислота и методы ее определения

Мочевая кислота (2,6,8-триоксипурин) является конечным продуктом об­мена пуриновых оснований, входящих в состав сложных белков — нуклеопротеинов. Образующийся в процессе дезаминирования аденозина гипоксантин превращается в ксантин, который далее окисляется с участием ксантиноксидазы в мочевую кислоту.

При отсутствии пуринов в пище образование и экскреция мочевой кисло­ты у человека идут примерно с равными скоростями.

К продуктам, содержащим мало пуриновых оснований, относятся молоко, сыр, яйца; продукты же, богатые нуклеиновыми кислотами (печень, зобная железа и др.), содержат большие количества пуринов.

Качественной реакцией на мочевую кислоту служит мурексидная проба, основанная на образовании мурексида — аммонийной соли пурпуровой кис­лоты красного цвета.

Среди известных методов количественного определения концентрации мочевой кислоты различают:

- химические - с колориметрическим завершением, основанные на способ­ности мочевой кислоты давать окрашенные соединения за счет восста­новления фосфорновольфрамовой, мышьяково-молибденовой кислоты, железосинеродистого калия и некоторых других веществ; участвовать в фенолгипохлоритной реакции; взаимодействовать с реактивом Фолина—Дениса;

- прямые фотометрические, базирующиеся на регистрации абсорбции мо­чевой кислоты при длине волны 293 нм;

- энзиматические (уриказные): конечноточечные и кинетические.

В последние годы разработано энзиматическое спектрофлюориметрическое определение содержания мочевой кислоты (связанное с использованием

р-гидроксифенилуксусной кислоты в качестве флюорофора), а также калори­метрические исследования — состоящие в измерении количества теплоты, вы­деленной в процессе протекания реакции с участием ферментов уриказы и каталазы (колориметрический ферментный метод).

Содержание мочевой кислоты исследуют также способом жидкостной и ионообменной хроматографии.

В последние годы в клинико-диагностических лабораториях для исследования содержания мочевой кислоты все более широко используются прямой спектрофото- метрический и уриказный методы определения.

Работа №11 Определение мочевой кислоты в сыворотке крови и моче.

Принцип метода Мочевая кислота окисляется кислородом воздуха при каталитическом действии уриказы с образованием Н₂ О₂ и алантоина. Образовавшаяся перекись водорода определяется по реакции окислительного азосочетания с 4- хлор-3 –метилфенолом и 4 – аминоантипирином в присутствии пероксидазы.