Задания для контроля

1. Перечислите методы определения мочевины в сыворотке крови и моче.
2. Каков принцип метода определения мочевины в сыворотке крови и моче?
3. Приведите формулу расчета определения мочевины в сыворотке крови и моче.
4. Какова норма содержания мочевины в сыворотке крови и моче?
5. Каково клинико-диагностическое значение определения мочевины в сыворотке крови и моче?
6. Как изменяется содержание мочевины в крови при заболеваниях почек почему?
7. Какой фермент участвует в превращении креатина в креатинин и где этот процесс локализован?
8. Каков принцип метода определения креатинина в сыворотке крови и моче?
9. Приведите формулу расчета определения креатинина в сыворотке крови и моче.
10. Какова норма содержания креатинина в сыворотке крови и моче?
11. Каково клинико-диагностическое значение определения креатинина в сыворотке крови и моче?
12. Дайте объяснение понятию клиренс.
13. Что лежит в основе постановки пробы Реберга?
14. С какой целью в клинике ставят пробу Реберга?
15. Приведите формулы расчета при постановке пробы?
16. Какова норма фильтрации и реабсорбции почек при постановке пробы Реберга?
17. В чем заключается принцип определения мочевой кислоты в сыворотке крови и моче?
18. Какое количество мочевой кислоты выделяется в норме с мочой в сутки?
19. С какой целью определяют в клинике мочевую кислоту в крови и моче?
20. Какова норма содержания мочевой кислоты в сыворотке крови и моче?

IV ИССЛЕДОВАНИЕ ПИГМЕНТНОГО ОБМЕНА

Наиболее хорошо известный пигмент крови — гемоглобин. Это сложный белок, хромопротеин, который состоит из белковой части, глобина, и простетической группы, представленной четырьмя гемами. Структура каждого гема хорошо изучена.

Известно, что средний срок жизни эритроцитов составляет 100—110 сут. По окончании этого периода происходит их разрушение. Деструкции под­ергается и содержащийся в эритроцитах гемоглобин. Процесс распада на­чинается уже в сосудистом русле, а завершается в клеточных элементах сис­темы фагоцитирующих мононуклеаров (купферовских клетках печени, гис­тиоцитах соединительной ткани, плазматических клетках костного мозга). После выхода гемоглобина из структуры эритроцитов так называемый внеэритроцитарный гемоглобин связывается с гаптоглобином плазмы, образуя комплекс «гемоглобин—гаптоглобин». Благодаря этому гемоглобин задер­живается в сосудистом русле, не проходя через почечный фильтр. Вследствие трипсиноподобного действия бета-цепи гаптоглобина и вызванных его вли­янием конформационных изменений в порфириновом кольце тема создают­ся условия для более легкого разрушения гемоглобина в клеточных элемен­тах системы фагоцитирующих мононуклеаров (печени, селезенки, костного мозга и других органов). Вначале происходит разрыв метинового мостика между I и II пиррольными ядрами порфиринового кольца с одновременным окислением двухвалентного железа в трехвалентное. Образующийся таким образом высокомолекулярный пигмент зеленого цвета вердоглобин (синони­мы: вердогемоглобин, холеглобин, псевдогемоглобин) представляет собой комплекс, состоящий из глобина, разорванной системы порфиринового кольца и трехвалентного железа. Дальнейшие превращения приводят к поте­ре вердоглобином железа и глобина, в результате чего порфириновое кольцо разворачивается в цепь и формируется низкомолекулярный желчный пиг­мент зеленого цвета — биливердин. Почти весь он ферментативным путем восстанавливается в важнейший красно-желтый пигмент желчи — билирубин, являющийся обычным компонентом плазмы крови. При распаде 1 г гемо­глобина образуется 34 мг билирубина. Будучи водонерастворимым, свобод­ный билирубин соединяется с альбумином плазмы, который служит основ­ным его транспортером в плазме крови. Комплекс «альбумин—билирубин», доставленный с током крови в печень, на поверхности плазматической мембраны гепатоцита подвергается диссоци­ации.

В настоящее время под свободным билирубином принято понимать неконъюгированный (с глюкуроновой кислотой) билирубин, который из-за плохой растворимости в воде дает трудную, непрямую (происходящую лишь после внесения в пробу этилового спирта или другого ускорителя, «акселера­тора») реакцию с диазореактивом Ван ден Берга. Поэтому его раньше имено­вали «непрямой» билирубин. Билирубинглюкурониды (или связанный, коньюгированный билирубин) в отличие от свободного билирубина тотчас вступа­ют в реакцию с диазореактивом («прямой» билирубин). Следует иметь в виду, что в самой плазме крови билирубин, не конъюгированный с глюкуроновой кислотой, может быть либо связан с альбумином, либо нет. Последняя фрак­ция (не связанного ни с альбумином, ни с липидами, ни с другими компонен­тами крови билирубина) наиболее токсична. При внутривенном введении ее в организм животного наступает некроз печени, сопровождающийся выходом ферментов в кровь; происходят гемолиз эритроцитов, разобщение окисления и фосфорилирования.

Эта фракция при ее повышении проявляется поражением центральной нерв­ной системы, возникновением очагов некроза в паренхиматозных органах, подавлением клеточного иммунитета, развитием анемии вследствие гемоли­за эритроцитов.

Для определения содержания билирубина в сыворотке (плазме) крови используют в основном химические и физико-химические методы исследования, среди которых выделяют колориметрические, спектрофотометрические (ручные и автоматизированные), хроматографические, флюориметрические и некоторые другие.

Большинство из них базируется на описанной еще Эрлихом в 1884 г. реак­ции билирубина (мочи) с диазофенилсульфоновой кислотой.

В клинико-лабораторной практике наиболее широко используется способ определения общего («полного»), свободного («непрямого») и связанного («прямого») билирубина является метод Йендрашика – Клеггорна-Грофа, который был выбран в качестве унифицированного.

Пробы должны анализироваться в течение 2 ч с момента взятия крови ли они хранятся при комнатной температуре и в темноте, или в течение 12ч при хранении в условиях охлаждения при температуре 2—8°С в темноте.

Гемолиз сыворотки снижает количество определяемого билирубина про­порционально присутствию в пробе гемоглобина. Следовательно, сыворотка крови не должна быть гемолизирована: это приводит к ошибочному заниже­нию результатов. Напротив, выраженная липемия обусловливает завышение результатов, если не делается измерение относительно «бланка» пробы.

Концентрация общего билирубина в плазме крови новорожденных со­ставляет: 22,2—70,1 мкмоль/л (1—2-е сут), 22,2—196,6 мкмоль/л (З-и-4-е сут), 22,2-208,9 мкмоль/л (5-6-е сут), 22,2-167,6 мкмоль/л (7-10-е сут)| 17,1—85,5 мкмоль/л (до 1 мес); в плазме крови взрослых — 17±4,25 мкмоль/л.