Методика выполнения лабораторной работы

Описать колонии дрожжей на плотной питательной среде. Результаты записать в табл. 5.

Таблица 5

Описание колонии дрожжей

Форма вегетативных клеток дрожжей разнообразна: округлая, овальная, яйцевидная, цилиндрическая, лимоновидная. Многие дрожжи размножаются почкованием. При почковании на поверхности клетки образуется маленький бугорок – почка, который постепенно увеличивается почти до размеров материнской клетки. При одновременно или последовательно формирующихся почках на разных сторонах материнской клетки происходит множественное или многостороннее почкование. Размножение делением осуществляется за счёт образования поперечной перегородки – септы.

1) приготовить препарат «раздавленная капля». При микроскопировании объективом 40 определить форму дрожжевой клетки и зарисовать. Выявить почкующиеся клетки и зарисовать их. Результаты занести в табл. 6.

Таблица 6

Форма клеток и почкование дрожжей

2) приготовить окрашенные препараты дрожжей. Выявить гликоген, волютин, жир. Результаты записать в табл. 7.

- для выявления гликогена на предметное стекло наливают каплю раствора йода в йодистом калии и размешивают в ней петлю жидкой культуры дрожжей. Препарат накрывают покровным стеклом и дают ему немного постоять. После этого рассматривают препарат под микроскопом. Наличие в клетке бурых зёрнышек, крапинок и капелек говорит о присутствии гликогена;

- для выявления волютина на фиксированный жиром препарат дрожжей наливают 1-2 капли метиленовой сини. Через 3 мин препарат споласкивают водой и накрывают покровным стеклом. Сбоку под стекло подводят каплю 1% серной кислоты, которая обесцвечивает все части клетки, кроме волютина. При микроскопировании волютин можно обнаружить в виде капель сине-фиолетового цвета; протоплазма имеет голубой цвет;

- для простой окраски жира на предметное стекло помещают каплю дрожжевой эмульсии, приливают каплю раствора Судана III и дают препарату немного постоять. Под микроскопом протоплазма клетки бесцветна, а жир красного цвета.

Таблица 7

Внутриклеточные включения дрожжевых клеток

3) приготовить препараты дрожжевых клеток, окрашенные метиленовой синью. Определить наличие живых и мёртвых клеток, а также количество почкующихся клеток. Результаты записать в табл. 8. Окрашенные клетки дрожжей являются мёртвыми.

Таблица 8

Мёртвые и почкующиеся клетки в препаратах дрожжей