Микробиологическая диагностика

Анаэробные грамположительные кокки редко выделяются в монокультуре. В подавляющем большинстве случаев они составляют только часть полимикробных ассоциаций, наряду с аэробными грамположительными кокками (инфекции кожи и мягких тканей), аэробными грамотрицательными бактериями (интраабдоминальные и тазовые инфекции) и другими анаэробами.

Для того, чтобы идентифицировать анаэробы, нужно четко следовать установленным правилам забора, транспортировки и особенностям культивирования. Пептострептококки очень чувствительны к действию кислорода; поэтому, при отсутствии стандартных контейнеров, материал при предполагаемой анаэробной инфекции должен быть доставлен в лаборатории в кратчайшие сроки (до 1 часа).

Субстратами для бактериологического исследования являются:

· кровь,

· плевральная жидкость,

· перитонеальная жидкость,

· пунктат из суставов,

· моча, полученная путем надлобковой пункции,

· гной из абсцессов, глубоких ран и других полостей,

· соскобы или мазки из язв, свищей, глубоких ран (после предварительной обработки - снятия поверхностных некрозов, фибриновых наслоений и др.),

· биоптаты (кости, мышцы, подкожная клетчатки, участки стенок абсцессов, свищей и др.).

Прежде всего, во избежание ложноположительного результата, необходимо максимально избегать контаминации исследуемого материала флорой кожных покровов и слизистых (составляющей которой, как известно, являются анаэробы). Существует ряд специальных приемов, позволяющих «идти в обход» нормальной микрофлоре покровных тканей. Например, одним из лучших методов забора материала из глубоких абсцессов, полостных органов (мочевой пузырь), а также других полостей тела служит простая аспирация шприцем содержимого.

Обязательное требование тщательная обработка не содержащими хлора антисептиками кожи и слизистой до манипуляции. В случае быстрой доставки в лабораторию, отпадает необходимость в использовании транспортных сред, поскольку, после удаления пузырьков воздуха, можно согнуть иглу у основания или надеть на ее кончик стерильную резиновую заглушку и отправить материал прямо в шприце (желательно, в течение 30 минут).

Другой доступный метод получения материала – биопсия (возможна и толстоигольная биопсия).

Оптимально – особенно при отправке биопсийного материала использование транспортных систем (контейнеров), заполненных водородом, углекислым газом и азотом с индикатором для предупреждения «разгерметизации» и, как следствие, создания аэробных условий. Возможно, поместить биоптат в смесь, состоящую из 1 части цитратной донорской крови и 9 частей изотонического раствора хлорида натрия или в обычный физиологический раствор.

Соскобы и мазки из ран, полостей, свищей и язв следует немедленно поместить в стерильные пробирки, заполненные углекислым газом и доставить в лабораторию в течение ближайшего получаса; возможно также, в случае более длительной транспортировки, поместить их в полужидкую стерильную среду Саrеу - Blair.

Идентификацию анаэробных кокков не следует проводить в:

· мазках из зева, ротовой полости, носа;

· мазках из влагалища и цервикального канала;

· моче, если она получена не путем надлобковой пункции;

· содержимом желудка, толстого и тонкого кишечника;

· фекалиях;

· из поверхностных ран.

Важным этапом дальнейшей лабораторной диагностики является окраска по Граму, позволяющая опытным специалистам высказать предварительный диагноз и внести коррекции в план лечения.

Для видовой спецификации возбудителей в настоящее время доступны ряд коммерческих тест-систем, использование которых требует минимальных временных затрат (от 36 до 48 часов). Это имеет определенное практическое значение, поскольку известно, что анаэробы, в том числе анаэробные грамположительные кокки, растут довольно медленно, что затрудняет «скорую» идентификацию возбудителей.

Тесты на ферментативную хроматографию и ПЦР дорогостоящие, но позволяют идентифицировать возбудителя.

Следующий этап – определение чувствительности выделенных культур к антибиотикам. Ряд авторов высказывают мнение о нецелесообразности проведения таких исследований, за исключением случаев бактериемии, эндокардита, инфекций ЦНС, костей, суставов и случаев заболеваний, резистентных к антибиотикотерапии. Тем не менее, желательно оценить чувствительность к пенициллину, пенициллинам с ингибиторами бета-лактамаз, линкозамидам, хлорамфениколу, цефокситину или другим цефалоспоринам II поколения с антианаэробной активностью, фторхинолонам III или IV поколения, метронидазолу и карбапенему. Несмотря на то, что чувствительность пептострептококков к бета-лактамам, клиндамицину и метронидазолу составляет 96%, 84% и 88%, соответственно, существует потенциальная угроза растущей резистентности среди данных возбудителей.