Определение глюкозы в крови глюкозооксидазным методом

1. Для определения глюкозы в крови глюкозооксидазным методом готовят опытную и холостую пробы в соответствии с приведенной ниже таблицей:

Отмерить (мл) Опытная проба (мл) Холостая проба (мл)
Сыворотка крови 0,05
Дистиллированная вода 0,05
ТХУ (3% раствор) 0,5 0,5

2. Полученные смеси встряхивают и центрифугируют при 8000g в течение 5 мин.

3. Далее с пробами работают в соответствии со следующей таблицей: из холостой и опытной пробирки отбирают по 0,2 мл надосадочной жидкости и смешивают с 2,0 мл рабочего реагента, который содержит глюкозооксидазу.

Отмерить (мл) Опытная проба (мл) Холостая проба (мл)
Надосадочная жидкость 0,2 0,2
Рабочий реагент 2,0 2,0

4. Затем опытную пробу инкубируют в течение 15 мин. при 37°С.

5. Оптическую плотность в опытной пробе измеряют при 520 нм против холостой пробы.

6. Концентрацию глюкозы (в ммоль/л) в сыворотке крови определяют с помощью калибровочного графика.

Для построения калибровочного графика в две пробирки вместо 0,05 мл сыворотки крови вносят по 0,05 мл стандартных растворов глюкозы с концентрациями 5,55 ммоль/л и 16,67 ммоль/л, соответственно.


Понравилась статья? Добавь ее в закладку (CTRL+D) и не забудь поделиться с друзьями:  



double arrow
Сейчас читают про: