Студопедия
МОТОСАФАРИ и МОТОТУРЫ АФРИКА !!!


Авиадвигателестроения Административное право Административное право Беларусии Алгебра Архитектура Безопасность жизнедеятельности Введение в профессию «психолог» Введение в экономику культуры Высшая математика Геология Геоморфология Гидрология и гидрометрии Гидросистемы и гидромашины История Украины Культурология Культурология Логика Маркетинг Машиностроение Медицинская психология Менеджмент Металлы и сварка Методы и средства измерений электрических величин Мировая экономика Начертательная геометрия Основы экономической теории Охрана труда Пожарная тактика Процессы и структуры мышления Профессиональная психология Психология Психология менеджмента Современные фундаментальные и прикладные исследования в приборостроении Социальная психология Социально-философская проблематика Социология Статистика Теоретические основы информатики Теория автоматического регулирования Теория вероятности Транспортное право Туроператор Уголовное право Уголовный процесс Управление современным производством Физика Физические явления Философия Холодильные установки Экология Экономика История экономики Основы экономики Экономика предприятия Экономическая история Экономическая теория Экономический анализ Развитие экономики ЕС Чрезвычайные ситуации ВКонтакте Одноклассники Мой Мир Фейсбук LiveJournal Instagram

A) Определение концентрации микроорганизмов в счетной камере




Как известно, в счетную камеру помещается разведенная суспензия окрашенных микроорганизмов, после чего под микроскопом подсчитывается число клеток, наблюдаемых в пределах ряда квадратов сетки, наносимой на поверхность камере. Каждый малый квадрат сетки соответствует определенному объему - v - микроскопируемой суспензии (обычно 1/4000000 мл). Если в просмотренных n малых квадратах найдено всего T микроорганизмов, то среднее число микроорганизмов, соответствующее одному малому квадрату, равно .

Отсюда концентрация микроорганизмов в данной суспензии составляет . Если при подготовке суспензии для микроскопии в камере исходная культура была разведена в k раз, то концентрация в культуре выразится формулой:

(29a)

Напомнив, таким образом, последовательность расчетов, связанных с применением счетных камер, обратимся к конкретному примеру. Допустим, в камере Горяева при просмотре разведенной в 100 раз культуры E. coli найдено в 20 малых квадратах всего 144 клетки. Отсюда среднее количество клеток в одном квадрате . По формуле (27а) находим доверительный интервал для с уровнем достоверности 95 %:

или в относительном выражении - по формуле (28а):

В камере Горяева одному малому квадрату соответствует объем 1/4000000 мл. Следовательно, по формуле (29а) концентрация в исходной культуре составляет:

клеток/мл

Доверительный интервал найденной концентрации в относительном выражении будет тем же, что был найден для , т.е. ±16,6% . В абсолютном выражении он составит, очевидно, 2,88´109±0,48´109 клеток/мл. Таким образом, с вероятностью 95% можно полагать, что действительная концентрация клеток E. coli в исходной культуре находится в интервале от 2,40´109 до 3,36´109 клеток/мл.

Если нужно оценить доверительный интервал с вероятностью 99% , то производим аналогичный расчет с помощью формул (27б) и (28б). Легко показать, что в том же примере результат составит 2,88´109±0,65´109 клеток/мл.


Рассмотрим теперь встречающийся иногда в практике случай, когда концентрация микроорганизмов оценивается по результатам микроскопирования в камерах двух или более различных разведений одной и той же культуры. В этом случае при расчете концентрации в исходной культуре следует исходить из среднего взвешенного количества микроорганизмов на один малый квадрат счетной камеры, которое вычисляется из частных средних, найденных для каждого из просмотренных разведений культуры (с поправкой на разную степень разведения), по формуле:

(30)

где , ,…………. , - средние количества микроорганизмов в одном малом квадрате, найденные при просмотре в камере 1-го, 2-го (m-1)-го и m-го разведений культуры, пронумерованных в порядке возрастания кратности разведения суспензии, а К1, К2,………..Кm-1, Кm, - величины соответствующих кратностей разведения суспензии. При конечном расчете концентрации в исходной культуре формула (29а) в данном случае примет вид:




(29б)

Расчет доверительного интервала для также видоизменяется. В относительном выражении доверительный интервал как , так и концентрации в исходной культуре вычисляется по формуле:

(31a)

для уровня достоверности 95% и

для уровня достоверности 99%. Здесь обозначает сумму общих количеств клеток, подсчитанных во всех просмотренных квадратах каждой из камер.

Приведем пример. Допустим, что определение концентрации микробных клеток производилось в двух камерах Горяева (v=1:4000000). В первую помещена культура E. coli, разведенная в 20 раз (K1) , а во вторую - та же культура, разведенная в 100 раз (K2). В первой при просмотре 20 малых квадратов найдено 256, а во второй в 27 квадратах найдена 81 клетка. Отсюда , а Далее

=2,63

Следовательно, концентрация в исходной культуре составит по формуле(29б):

клеток/мл

Доверительный же интервал как , так и концентрации культуры в относительном выражении составит по формуле (31а):

%

для уровня вероятности 95 %, а по формуле (31б):

%

для уровня вероятности 99 %. Таким образом, действительное значение концентрации клеток в исходной культуре с вероятностью 95 % находится в интервале 1,05´109± 0,11´109, а с вероятностью 99 % - 1,05´109± 0,15´109.



Посмотрим теперь, как убедиться в существенности различий концентраций в двух культурах, если определения проводились с помощью счетных камер. Для этого наиболее удобны критерии, выражаемые неравенствами:

(32a)

уровень вероятности 95 % и

(32б)

уровень вероятности 99 %,

где - абсолютная величина разности концентраций микроорганизмов в сравниваемых культурах, а и - общие количества микроорганизмов, подсчитанных в камере при определении соответствующей культуры.

Так, например, при сравнении двух культур СТИ с помощью подсчета в камерах установлены концентрации 254´106 и 477´106 клеток/мл. При определении концентрации в первой культуре общее число микроорганизмов, подсчитанных в камере, составило 124, а при определении во второй культуре - 145. Подставим эти значения в формулу (32а). Левая часть неравенства составит , правая часть - . Поскольку 223>90, можно с вероятностью 95 % считать, что наблюдаемое различие концентраций достоверно. Воспользовавшись формулой (32б), можно также показать, что в приведенном примере различие концентраций достоверно и с вероятностью 99 %.

В заключение остановимся на оценке доверительного интервала отношения концентраций двух культур. Это можно сделать с помощью формул:

, (33а)

уровень вероятности 95 %

, (33б)

уровень вероятности 99 %.

и имеют здесь то же значение, что и в формулах (31а) и (32б). Обращаясь вновь к только что использованному примеру, находим, что отношение концентраций сравниваемых культур СТИ составляет:

.

Далее по формуле (33а):

а по формуле (33б):

Таким образом, с вероятностью 95 % можно полагать, что истинное значение отношения концентраций расположено в интервале 0,53±0,13, а с вероятностью 99 % - в интервале 0,53±0,18.





Дата добавления: 2015-05-30; просмотров: 2269; Опубликованный материал нарушает авторские права? | Защита персональных данных | ЗАКАЗАТЬ РАБОТУ


Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Лучшие изречения: Учись учиться, не учась! 10388 - | 7888 - или читать все...

 

3.233.226.151 © studopedia.ru Не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования. Есть нарушение авторского права? Напишите нам | Обратная связь.


Генерация страницы за: 0.004 сек.