Изолирование барбитуратов подщелоченной водой

1.Настаивание измельченного объекта с водой, подщелоченной 20% NaОН до рН=10 в течение 30 минут.

2.Очистка водного извлечения путем насыщения вольфраматом натрия в кислой среде до рН=2 с последующим фильтрованием

3.Эктсрагирвоание эфиром и концентрирование упариванием.

Достоинства метода: качественный анализ с получением чистых извлечений.

Недостаток метода: при обработке вольфраматом натрия барбитураты осаждаются вместе с белками.

Частный метод изолирования алкалоидов водой, подкисленной серной кислотой (метод В.Ф. Крамаренко)

1.Настаивание измельченного объекта с водой, подкисленной 20% серной кислотой до рН=2-3 в течение 2 ч

2.Очистка водного извлечения от белков путем насыщения сульфатом аммония в течение 1 часа и фильтрование.

3.Экстракция эфиром для очистки от жиров, пигментов, смол. Эфирные извлечения отбрасывают.

4.Подщелачивание водного извлечения 20% NaОН до рН=9-10 и трехкратная экстракция хлороформом. Отделение органической фазы и концентрирование упариванием.

Достоинства метода: быстрота, хорошая очистка

Недостаток метода: потеря некоторых веществ из-за соэкстракции.

Особенности исследования биологических жидкостей (кровь, моча, плазма, слюна, промывные воды желудка).

На второй стадии изолирования используют часто жидкость-жидкостную экстракцию. При этом вместе с ядами могут экстрагироваться сопутствующие вещества, что требует дальнейшей очистки.

Иногда применяют сорбцию на синтетических смолах, активированном угле, селикогелях. При этом не проводят изолирование, однако при неизвестном яде возникает опасность его потери из-за недостаточной сорбции.

Очистка изолируемых веществ от сопутствующих компонентов биоматериала

Очистку проводят для того, чтобы получить более точные результаты в связи с удалением соэкстрактивных веществ, маскирующих окраску, снижающих чувствительность реакций. Без очистки часто получаются завышенные результаты количественного определения.

На первом этапе изолирования проводят:

1.Удаление механических загрязнений фильтрованием или центрифугированием.

2.Осаждение примесей органическими растворителями (спирт, ацетон, ТХУ – трихлоруксусная кислота) или насыщенными электролитами (NaCl).

На втором этапе изолирования или после него проводится реэкстракция, т.е. переведение вещества из одной жидкой фазы в другую при изменении рН, сублимация (возгонка) и хроматография.