Хід роботи

Для вирощування анаеробів цим методом необхідно мати скляні трубки довжиною 30 см і внутрішнім діаметром 4-6 мм. Один кінець трубки відтягують і запаюють, як в пастерівській піпетці, а другий опалюють і вставляють вату. Перед використанням трубки стерилізують. Напіврідкий агар для трубок Вейона готують у пробірках по 10 см³ в кожній. Перед посівом середовище попередньо прогрівається за температури 100 ºС протягом 15-20 хв і охолоджується до температури 50 ºС. Посів у трубки Вейона проводиться наступним чином: 1 см³ досліджуваного матеріалу вносять у пробірку з 10 см³ розплавленого і охолодженого агару. Швидким обертальним рухом пробірки між долонями, змішують вміст пробірки. Отримують перше розведення (1:10). Далі 1 см³ з цієї пробірки переносять у наступну пробірку (друге розведення 1:100). Залишком від першого розведення наповнюють трубку Вейона. Для цього відтягнутий кінець трубки обламують пінцетом над полум’ям пальника, занурюють у пробірку майже до самого дна і через вільний кінець трубки, не виймаючи з нього ватного корка, засмоктують агар на ¾ висоти трубки. Після наповнення відтягнутий кінець трубки знову запаюють. Так повторюють з другою, третьою і наступними пробірками, засіваючи 3-4 розведень. З кожного розведення наповнюють по одній трубці. Трубки потрібно позначити номерами в порядку їх наповнення від першого розведення до наступних. Заповненні і запаяні трубки охолоджують і ставлять у термостат за температури 37 ºС та інкубують протягом 48-72 години. Через 2-3 дні у трубках, засіяних великими розведеннями, можна спостерігати окремі колонії, а також розриви стовпчика агару в кількох місцях внаслідок газоутворення. У трубках, засіяних малими розведеннями матеріалу розрив агару буває настільки інтенсивним, що з трубок виштовхується ватний корок. З трубок, де засіяні великі розведення, можна виділити чисті культури анаеробів. Верхній шар агару у трубках, приблизно на відстані 1-2 см від поверхні, залишається чистим від росту мікроорганізмів, оскільки внаслідок аерації, яка відбувається в момент посіву, анаероби у цьому шарі не ростуть. Після термостатування трубки проглядають і вибирають одну з них з ізольованими колоніями. Відтягнутий кінець трубки обережно обламують пінцетом і вміст трубки видувають у чашку Петрі. Намічені колонії за допомогою петлі чи пастерівської піпетки пересівають у середовище Кітт-Тароцці для виділення чистої культури анаеробів, які потім ідентифікують. При наявності відповідних розведень метод Вейона можна застосовувати і для кількісного підрахунку анаеробів.

Для визначення вмісту анаеробних мікроорганізмів можна використовувати анаеростати, або газогенеруючі пакети, які створюють анаеробні умови під час культивування бактерій. При цьому висівання дослідного матеріалу проводять в чашки Петрі, які поміщають у анаеростат.