Для целей гистохимии, особенно для выявления липидов и ферментов, хорошо себя зарекомендовала заливка ткани в синтетические водорастворимые пластмассы —полиэтиленгликоль, поливакс, метилметакрилат и др.
Заливка в полиэтиленгликоль различной молекулярной массы по Ринерхарту—Абуль-Хею Вариант 1 | Заливка в полиэтиленгликоль различной молекулярной массы по Ринерхарту—Абуль-Хею Вариант 2 | Заливка в поливакс по Стидмену | Заливка в метилметакрилат по Хиршу—Болларду |
· Формалин5% 24-48ч · Промывание в проточной воде 12ч · Полиэтиленгликоль-400 + дистиллированная вода (1:1) 30м · Полиэтиленгликоль-400 + дистиллированная вода (3:1) 30м · Полиэтиленгликоль-400 30м · Полиэтиленгликоль-1000 40"С 30 м · Заливка смесью полиэтиленгликоль-1550 + полиэтиленгликоль-4000 (1:9) при 58 "С 30 м | · Формалин5% 24-48 ч · Промывание в проточной воде 12 ч · Заливка смесью полиэтиленгликоль-1550 + полиэтилен-гликоль-4000 (1:9) при 58 "С 1—3ч · Заливка свежей порцией смеси при 58 "С 30 м · Заливка смесью при 58 "С | · Формалин 5 % 6—24 ч · Промывание в проточной воде6— 12ч · Обезвоживание в 70 % и 96 % спиртах 24 ч · Спирт 96 % + поливакс (1:1) 2ч · Поливакс 40"С Зч · Свежая порция поливакса при 40 "С 3 ч Заливка в поливакс при 40 "С Застывание блоков при комнатной температуре | · Формалин 5 % 6— 12 ч · Промывание в 70 % спирте 10 м · Споласкивание в 96 % спирте 2 м · Спирт 96 % 2ч · Метилметакрилат 2 ч · Смесь (А+Б+В+Г) при 50 "С 2ч · Свежая порция этой смеси при 50 -60 "С 6 - 10ч · Затем материал выдерживают при комнатной температуре в течение 1 суток |
Заливка в полиэтиленгликоль различной молекулярной массы по Ринерхарту—Абуль-Хею
|
|
Срезы с залитых в полиэтиленгликоль блоков готовят на замораживающем микротоме, окрашивают, помещают на предметное стекло и заключают в смесь глицерина и желатина или раствор диэтиленгликоля (диэтиленгликоля — 4 части, дистиллированной воды — 5 частей, 40 % формалина — 1 часть).
Заливка в поливакс по Стидмену
Поливакс (полиэстервакс) представляет собой смесь полиэтилен-гликоля-400-дистеарата и ацетилалкоголя в соотношении 9:1.
Заливка в метилметакрилат по Хиршу—Болларду
Смола имеет сложный состав и состоит из четырех компонентов, которые смешивают в определенной последовательности:
1. 10 мл метилметакрилата (А)
2. + 5 мл полиэталенгликоля (Б)
3. + 3 мл дибутилфталата (В)
4. + 0,2 г бензоилпероксида (Г).