Методика выполнения работы

В качестве субстрата используется 20%-ная хлебная суспензия в глициновом буфере (рН 2,2). К 10 мл полученного субстрата, приготовленного из мякиша хлеба и выдержанного в термостате при температуре 37ºС в течение 20 минут, добавить 10 мл 0,02%-ного раствора пепсина. Гидролиз провести при температуре 37ºС в течение 90 минут в термостате. При этом через каждые 30 минут из реакционной пробы, не прерывая опыта, отбирать по 2 мл исследуемой суспензии в стакан. Затем в сосуд вносят такой же объем глицинового буфера. К отобранной для анализа суспензии добавить 3 мл 10%-ного раствора трихлоруксусной кислоты для ингибирования протеолиза и поставить стаканы с суспензией в термостат. Через 90 минут осадок отделить центрифугированием в течение 5 минут при 3000 об/мин. В надосадочной жидкости провести определение оптической плотности растворов, содержащих продукты гидролиза белка с помощью фотоэлектрокалориметра в кювете с шириной грани 1 см при длине волны 300 нм. Значение переваримости можно получить взвешиванием остатков переваривания.

Оформление результатов опыта

Полученные результаты выбора светофильтра записать в таблицу 15.

Таблица 15.

Количество пепсина, мл	Оптическая плотность

Построить графики динамики гидролиза белков хлебного мякиша под действием пепсина.

Контрольные вопросы

1. Какие методы используют для определения питательной ценности белков?

2. Чем определяется питательная ценность белков?

3. Напишите схему гидролиза белков в желудочно-кишечном тракте человека. Какие ферменты катализируют этот процесс?

4. Назовите функции белков в живых организмах.

5. Чем определяется биологическая ценность белков?

6. Как рассчитывается и что показывает аминокислотный скор белка.

Литература

[5, c.192-204; 368-371].

Лабораторная работа № 7.Определение содержания витаминов в растительном сырье при его обработке.

7.1 Цель работы: изучение методов определения витаминов в растительном сырье и вычисление процента потерь при его переработке.