Другие методы типирования

В качестве эпидемиологических маркеров может быть использована и нередко используется характеристика чувствительности штаммов энтеробактерий к различным антибактериальным лекарственным препаратам и в первую очередь - к антибиотикам.

В этом случае маркером служит спектр антибиотикорезистентности.

Обычно у штаммов, происходящих от эпидемиологически связанных случаев, спектры резистентности оказываются сходными. Достаточно успешным этот метод маркирования может оказаться при расшифровке вспышек заболеваний, вызванных энтеробактериями, в особенности, если другие методы определения эпидемиологических маркеров не дают желаемого результата.

Вместе с тем следует учитывать, что этот метод маркировки не всегда достаточно надежен вследствие возможности генетического обмена у энтеробактерий факторами, контролирующими резистентность, и соответственно возможности изменения антибиотикограмм.

Тем не менее, систематическое слежение за чувствительностью выделяемых энтеробактерий на той или иной территории имеет важное не только эпидемиологическое, но и клиническое значение.

Установление антибиотикограммы проводят с помощью известных методов определения чувствительности выделенной культуры к антибиотикам, в числе которых наиболее приемлемым для использования в практических условиях является метод диффузии в агар с применением набора коммерческих стандартных дисков с антибиотиками*(18).

Серологическая диагностика заболеваний и бактерионосительства

С целью улучшения диагностики заболеваний, вызываемых энтеробактериями, а также при проведении эпидемиологического анализа и выявления источников инфекции следует применять серологические исследования и, в частности, определять в сыворотке крови антитела к антигенам соответствующих возбудителей. Наибольшее значение серологические исследования приобрели в диагностике брюшного тифа, паратифов и других сальмонеллезов, в меньшей степени - при дизентерии. В случае выделения УПЭ серологические исследования могут также иметь определенное значение при оценке этиологической роли выделенных микробов.

Необходимо учитывать, что наиболее специфичным и чувствительным методом титрования антител является реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (РПГА). Для постановки РПГА с целью выявления антител к O-антигенам возбудителей брюшного тифа, паратифов, других сальмонеллезов и дизентерии применяют коммерческие стабильные эритроцитарные диагностикумы. При отсутствии эритроцитарных O-диагностикумов, а также для выявления H-антител применяют реакцию агглютинации (типа Видаля) с соответствующими коммерческими O- и H-диагностикумами*(19). Для серологической диагностики инфекций, вызываемых УПЭ (Esherichia, Yersinia, Citrobacter, Proteus и др.), коммерческие препараты не выпускают, поэтому реакцию агглютинации ставят с аутоштаммами.

При постановке любой из указанных серологических реакций следует учитывать одно принципиально важное обстоятельство. Человеческий организм в течение жизни многократно встречается с различными энтеробактериями и их антигенами, поэтому в крови многих практически здоровых людей могут присутствовать (иногда в значительных титрах) антитела к этим антигенам. Вследствие этого понятие "диагностический" титр определяемых антител носит лишь весьма условный ориентировочный характер. Следует учитывать и то, что для разных районов страны (в связи с особенностями эпидемической ситуации и др.) величина "диагностического" титра будет различной. Ее устанавливают в результате титрования сывороток от 100-200 здоровых лиц. Существенно большее диагностическое значение имеет нарастание уровня антител в динамике заболевания, для чего сыворотку нужно брать сразу после выявления больного, а затем - в конце первой или в начале второй недели болезни. В более поздние сроки заболевания титр антител к специфическому антигену снижается, что также может служить диагностическим признаком.

Значительную помощь для постановки более обоснованного диагноза оказывает определение не только общего (суммарного) титра антител без дифференциации их на классы иммуноглобулинов, но и антител, относящихся к классу иммуноглобулинов G (IgG). Нормальные (так называемые неспецифические), анамнестические и прививочные антитела, особенно к O-антигенам бактерий, принадлежат в основном к иммуноглобулину M (IgM) и могут содержаться в довольно высоком титре у многих здоровых людей.

Определение относительного содержания в сыворотках IgG-антител основано на том, что эти антитела устойчивы к обработке некоторыми редуцирующими веществами и, в частности, цистеином, тогда как IgG-антитела инактивируются этими реагентами.