Вирусы, природа, происх-е, методы культивир-я

Вирусы размнож-ся только в жив клетках. Культивир-е вируса происходит на уровне орг-ма подопытного жив-го и на уровне культуры клеток (вне орг-ма). Вирусы имеют тканевую и типовую специфич-ть. Поэтому при выдел-и неизвестн вируса одномоментно заражают 3-4 культуры клеток. Чаще используют эмбриональн ткани (кур/эмбрион). Вирусы оспы хорошо размнож-ся в хорион-аллантоисной оболочке, паротита – в амнионе, гриппа – в амнионе и аллантоисе, бешенства – в желточном мешке. Берут 12-дневные эмбрионы.

При невозмож-ти выделить и идентиф-ть вирус стандартными методами (на культуре клеток, кур/эмбрионах) инфекц материал вводят лаборат жив-м (мыши, кролики, обезьяны), после развития инфекц процесса проводят повторное зараж-е чувствительных клет культур. Методы типирования вирусов:

· микроскопические – вирусоскопия, обнаруж-е внутриклеточных включ-й;

· иммуновирусологич – метод иммунной электронн микроскопии, иммунофлюоресц-и, гемагглютин-и, гемадсорбции.

Идентиф-я вирусов – иммуновирусологич методы (РТГА, р-я задержки гемадсорбции, РСК, РН, преципитации в геле агара).

Для культив-я вирусов применяют: 1) п ервично-трипсинизиров культуры – сущность: разруш-е межклет связей в тканях протеолитич ферментами и разобщение клеток для выращ-я монослоя на стекле. Источник получ-я: ткани и органы эмбрионов чел-ка и жив-х. Используют норм и злокачественно перерождённые ткани. Способ-ть клеток размножаться тесно связана со степенью диффер-ки ткани: чем ниже диффер-ка, тем лучше клетки размнож-ся in vitro. Поэтому ткани эмбриона и опухоли лучше использовать. 2) к ультуры перевиваемых клеток – культуры клеток, способных к размнож-ю неопределённо долгое время. Ткани берут чаще опухолевые.

Строение бактериофагов. Взаимод-е Т-фагов с клеткой (адсорбция, проникн-е фаговой ДНК в к-ку, размнож-е фага и выход из к-ки). Лизогения и лизогенн конверсия, мех-м, использ-е фагов в медицине.

Бактериофаги – вирусы, паразит-ют в клетках бактерий. Различают бактериофаги: вегетат, вирулентные, дефектные, зрелые, умеренные. По спектру д-я: типовые фаги (Т-фаги – лизируют бактерии отд типов внутри вида), моновалентные (лизируют бактерии 1-го вида), поливалентные (лизируют бактерии нескольких видов). Бактериофаги устойчивы, переносят высокие t, дезинф-ю (кроме к-т и формалина), солнечный свет, УФО. Морфология: похожи на головастиков. Нуклеокапсид - по типу смеш симметрии. Головка – по типу кубич симметрии, ДНК-содерж геном, хвост – по типу спиральной симметрии, включает полый стержень, сократит чехол вокруг стержня, в дистальном отделе стежня – базальная пластина.

Взаимод-е Т-фагов с клеткой: адсорбция (при помощи рецепторов на бактер/стенке), инъекция (лизоцим хвоста расщепляет клет/стенку, чехол сокращ-ся и вталкивает стержень в клетку, вир ДНК впрыскив-ся), репродукция фага (вирус начинает генетич управл-е клеткой, синтез-ся фаговые белки и нулкиеновые к-ты), выход дочер/популяций (клетка хозяина лизир-ся).

Лизогения – способ-ть разл штаммов бактерий, содержащих бактериофаги, лизировать др штаммы бактерий, не разрушаясь при этом. Геном бактерии и умеренного фага сосуществуют в виде единой хромосомы, в кот-й ДНК фага включена в ДНК хромосомы бактерии. Перед-ся по наследству дочер/клеткам, фаговый геном освобожд-ся с последующим лизисом бактерии.

Лизогенная конверсия – ассоциация фаговой ДНК с геномом бактерии вызывает измен-е морфологии и Аг-св-в бактерии. Св-ва меняются не только у бактерии, но и у фага. Размножаясь в клетке, он способен захватывать некот-е гены бактерии и, инфицируя др клетку, передаёт приобрет гены новому хозяину. Это - трансдукция. В ней участвуют умеренные и дефектные фаги. Использ-ся как векторы в генной инженерии.

76. Бактериофаги, вирулентные и умеренные фаги. Мех-м взаимод-я вирулентного фага с микробом. Особ-ти морфогенеза крупных фагов.   Мех-м и крупные фаги смотри 75

Бактериофаг – вирус бактерий, паразитирует только на жив микробной клетке. Существуют вирулентные и умеренные фаги. Вирулентные фаги вызывают лизис бактерии и синтез новых фагов. Умеренные фаги не лизируют бактерию, их ДНК включ-ся в хромосому бактерии и при делении перед-ся неограниченному числу потомков – это лизогения.

Большинство фагов видоспецифичны, но есть фаги, способные поражать отд варианты одного и того же вида бактерий. Это используют для фаготипирования внутри вида. Бактериофаги применяют при эпидемиологич исслед-ях, выявляющих резервуар инф-и. По содерж-ю бактериофагов в воде судят о наличии в ней патогенных бактерий. Выдел-е бактерий 1-го фаготипа от разных б-ных указ-ет на общий источник зараж-я. Бактериофаги применяют с леч целью (стафилококковые).