Билет №7 микробиологическая диагностика

1. Бактерии – мельчайшие из организмов, обладающих клеточным строением; их размеры составляют от 0,1 до 10 мкм.

Споры- форма покоящихся фирмикутных бактерий с грам + типом стрения клеточной стенки. Споры образуются при неблагоприятных условиях (высушивание, диффецит пит. веществ и др факторы) внутри бактериальной клетки образуется одна спора- эндоспора. Образование спор способствует сохранению вида, и не является способом размножения, как у грибов. Спорообразующие бактерии рода Bacillus имеют споры, не превышающие диаметр клетки. Бактерии у которых размер споры превышает размер бактериальной клетки, называют клостридиями. Споры кислотоустойчивы поэтому окрашиваются по методу АУЕСКИ или по методу Циля-Нильсона в красный а вегетативная клетка в синий.

Расположение спор может быть: центральным, субтерминальным, терминальным

2. МБ брюшного тифа, морфология, тинкториальные и культурные свойства, антигенная структура возбудителя.

Salmonella typhi,

Таксономия. к отделу Gracilicutes, семейству Enterobacteriaceae, роду Salmonella

мелкие, гр- палочки с закругленными концами, не образуют спор, имеют микрокапсулу, перитрихи.

Культивирование. факультативные анаэробы. Они неприхотливы и растут без

всяких особенностей на простых питательных средах при температуре 37.С и рН среды 7,2.

7,4. дифференциально-диагностические среды: Эндо, Левина, висмут-сульфитный агар и др.

БХ: сбраживает глюкозу, мальтозу, маннит до кислоты, не сбраживает лектозу, сазарозу, индол. Образует сероводород.

Ф-ры. патог:. Сальмонеллы имеют О- и Н-Vi-антиген, факторы адгезии, каталаза, супероксиддисмутаза, эндотоксин, оказывающий энтеротропное, нейротропное и пирогенное действие.

Мех: фекально-оральный. водный путь передачи, реже пищевой и контактно-бытовой пути.

Заболеваемость отмечается летом и осенью.

Патогенез. Возбудители попадают в организм через рот, достигают тонкой кишки, в лимфатических образованиях которой размножаются, а затем попадают в кровь. Током крови они разносятся по всему организму, внедряясь в паренхиматозные органы (селезенку, печень, почки, костный мозг). При гибели бактерий освобождается эндотоксин, вызывающий интоксикацию. Из желчного пузыря, где сальмонеллы могут длительно, даже в течение всей жизни сохраняться, они вновь попадают в те же лимфатические образования тонкой кишки. В

результате повторного поступления сальмонелл может развиться своеобразная аллергическая реакция, проявляющаяся в виде воспаления, а затем некроза лимфатических образований. Выводятся сальмонеллы из организма с мочой и испражнениями.

Клиническая картина. Инкубационный период

продолжается 12.14 дней. Заболевание обычно начинается остро с повышения температуры тела, проявления слабости, утомляемости, нарушаются сон, аппетит,помрачение сознания (от греч. typhus. дым, туман), бред, галлюцинации, наличие сыпи. Очень тяжелыми осложнениями заболевания являются перитонит, кишечное

кровотечение в результате некроза лимфатических образований тонкой кишки.

Иммунитет. вырабатывается прочный и продолжительный иммунитет.

Микробиологическая диагностика. В качестве материала для исследования используют кровь, мочу, испражнения. Основным методом диагностики является бактериологический, завершающийся внутривидовой идентификацией выделенной чистой культуры возбудителя.

РНГА

Лечение. Назначают антибиотики. Применяют также иммуно-антибиотикотерапию.

Профилактика. санитарно-гигиенические мероприятия, вакцинацию в районах с неблагополучной эпидемической обстановкой. Применяют брюшнотифозную химическую и брюшнотифозную спиртовую вакцины, последняя обогащена Vi-антигеном. Для экстренной профилактики в очагах инфекции используют брюшнотифозный бактериофаг (в виде таблеток с кислотоустойчивой оболочкой и в жидком виде).

3. Применение РНГА при спец индикации БС принцип реакции иметодика выполнения.

РНГА реакция непрямой гемагглютинации. Сущность в том что олекулы антигена адсорбируются на поверхности эритроцита. Такие нагруженные эритроциты. Приобретают способность аглютенировать иммунной сывороткой.спецефичной для данного антигена. Эритроциты мсклеиваются и выпадают в осадок, образую гемаглютинат. Высокая чувствительность, простота постановки экспрессивности

Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА, РПГА) основана на использова­нии эритроцитов (или латекса) с адсорбиро­ванными на их поверхности антигенами или антителами, взаимодействие которых с соот­ветствующими антителами или антигенами сыворотки крови больных вызывает склеива­ние и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в виде фестончатого осадка.

Компоненты. Для постанов­ки РНГА могут быть использованы эритроциты барана, лошади, кролика, курицы, мыши, человека и другие, которые заготавли­вают впрок, обрабатывая формалином или глютаральдегидом. Ад­сорбционная емкость эритроцитов увеличивается при обработке их растворами танина или хлорида хрома.

Антигенами в РНГА могут служить полисахаридные АГ микро­организмов, экстракты бактериальных вакцин, АГ вирусов и риккетсий, а также другие вещества.

Эритроциты, сенсибилизированные АГ, называются эритроцитарными диагностикумами. Для приготовления эритроцитарного диагностикума чаще всего используют эритроциты барана, обла­дающие высокой адсорбирующей активностью.

Применение. РНГА применяют для диагностики инфекционных болезней, определения гонадотропного гор­мона в моче при установлении беременности, для выявления повышенной чувствительнос­ти к лекарственным препаратам, гормонам и в некоторых других случаях.

Механизм. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) отличается значительно более высокой чувствительностью и специфич­ностью, чем реакция агглютинации. Ее используют для иденти­фикации возбудителя по его антигенной структуре или для индикации и идентификации бактериальных продуктов — токси­нов в исследуемом патологическом материале. Соответственно используют стандартные (коммерческие) эритроцитарные анти­тельные диагностикумы, полученные путем адсорбции специфи­ческих антител на поверхности танизированных (обработанных танином) эритроцитов. В лунках пластмассовых пластин готовят последовательные разведения исследуемого материала. Затем в каждую лунку вносят одинаковый объем 3 % суспензии на­груженных антителами эритроцитов. При необходимости реакцию ставят параллельно в нескольких рядах лунок с эритроцитами, нагруженными антителами разной групповой специфичности.

Через 2 ч инкубации при 37 °С учитывают результаты, оценивая внешний вид осадка эритроцитов (без встряхивания): при отри­цательной реакции появляется осадок в виде компактного.диска или кольца на дне лунки, при положительной реакции — харак­терный кружевной осадок эритроцитов, тонкая пленка с неров­ными краями