Днк-лигазы

Наиболее универсальным является ДНК-лигаза фага Т4, катализирующая образование фосфодиэфирной связи между прилегающими 5'-фосфатным и 3'-гидроксильным концами цепей ДНК. Представляет собой мономерный полипептид с М=68000.

Кофакторы: АТФ, Mg²⁺

Активность: Лигирование липких и тупых концов.

Субстраты: 1)Двухцепочечные молекулы ДНК с комплементарными липкими концами, которые спариваются друг с другом и соединяются 3'-ОН и 5'-фосфатными концевыми группами.

2) ДНК с одноцепочечными разрывами

3) Двухцепочечные ДНК с 5'-фосфатным и 3'-ОН-тупыми концами в высоких концентрациях

Применение:

1) Сшивание молекул ДНК с совместимыми липкими концами.

2) Сшивание двухцепочечных молекул ДНК с тупыми концами друг с другом или с синтетическими линкерами. Активность ДНК-лигазы фага Т4 по оотношению к молекулам ДНК с тупыми концами может быть повышена примерно в 20 раз при добавлении РНК-лигазы фага Т4