double arrow

Хранить в холодильнике

3) 12% раствор едкого натра. 120 г NаОН растворяют в 1000 мл дистиллированной воды.

4) Пировинограднокислый натрий (пируват натрия).

Ход определения:

- берут 0,3 мл крови и смешивают в центрифужной пробирке с 0,7 мл дистиллированной воды;

- к гемолизату приливают 1 мл 10% раствора ТХУ (реактив1), перемешивают стеклянной палочкой и через 2-3 мин центрифугируют при 1500 оборотов в течении 15 мин.;

- надосадочную жидкость полностью сливают в пробирку (оптимизация для лучшей воспроизводимости: количественно - отобрать 1,5 мл), приливают 0,4 мл 0,1% раствора ДНФГ (реактив 2), смешивают и на 20 мин помещают в темное место при комнатной температуре;

- к содержимому пробирки приливают 1 мл 12% раствора едкого натра (реактив 3) и через 5 мин определяют оптическую плотность.

В качестве раствора сравнения (холостая проба) берут пробу, которую готовят подобным же образом, только вместо крови добавляют 0,3 мл дистиллированной воды.

Длина волны 450 нм, кюветы 5 мм

Количество пировиноградной кислоты в исследуемой пробе рассчитывают по калибровочной кривой.

Построение калибровочной кривой.

Готовят стандартный раствор пирувата натрия из расчета:

- 11 мг пирувата растворяют в 100 мл дистиллированной воды;

- в ряд из 6 пробирок вносят 0,05; 0,1; 0,15; 0,2; 0,25 и 0,3 мл стандартного раствора;

- добавляют 0,25; 0,2; 0,15; 0,1; 0,05 и 0 мл дистиллированной воды соответственно;

- в каждую пробирку добавляют 0,7 мл дистиллированной воды;

- проводят анализ растворов аналогично пробе крови.

Результаты выражают в мг пирувата натрия (по калибровочной кривой). Для перевода в единицы системы СИ (мкмоль/л) необходимо полученный результат умножить на 114.

В крови практически здоровых взрослых людей содержится до 0,114 ммо (114 мкмоль/л, 10 мг/л), а именно 0,0456 ммоль/л (45,6 мкмоль/л, 4 / 0,0912 ммоль/л (91,2 мкмоль/л, 8 мг/л) Норма для человека: 45,6 - 114 мкмоль/л.

Клинико-диагностическое значение исследования


Понравилась статья? Добавь ее в закладку (CTRL+D) и не забудь поделиться с друзьями:  



Сейчас читают про: