2015-04-20
771
Материалы и оборудование: пробирки; водяная баня; электроплитка; клубень картофеля; мел; р-р Люголя; микроскоп и все необходимое для приготовления препаратов; 5%-н раствор FeCl3; 96%-н этиловый спирт; крепкая серная кислота; спиртовки.
1. Выращивание маслянокислых микроорганизмов
Хорошее развитие типичных форм маслянокислых микробов удается получить на среде с картофелем.
Сырой неочищенный картофель нарезают мелкими кубиками, заполняют ими 1/3 высокой пробирки, добавляют немного мела (для нейтрализации масляной кислоты), заливают водопроводной водой на 2/3 и помещают в водяную баню при температуре 80° на 15 - 20 мин (для пастеризации). В среду не вносят ни почву, ни маслянокислых микробов, так как на кожуре картофеля всегда есть их споры. Пробирки плотно закрывают и помещают в термостат.
Через 2-5 суток картофель всплывает вследствии бурно идущего газообразования. Культуральную жидкость используют для исследования морфологии маслянокислых микроорганизмов и качественного определения продуктов брожения.
2. Микроскопирование маслянокислых микроорганизмов
Изучение маслянокислых бактерий проводят в «раздавленной» капле.
Для этого каплю сброженной жидкости (лучше из среднего слоя) наносят на предметное стекло, добавляют каплю раствора Люголя и покрывают покровным стеклом. Микроскопируют с объективами 40Х.
При микроскопировании обычно обнаруживают С. pasteiirianum, С. butyricum., C. felsineum. Обращают внимание на образовавшиеся у этих микроорганизмов споры, сильно преломляющие свет, и на клетки, содержащие гранулёзу, окрашенные в синий цвет.
Зарисовать микроорганизмы, относящиеся к группе маслянокислых.
Качественные реакции на масляную кислоту.
Получение маслянокислого железа
В пробирку наливают 3 - 5 мл сброженной жидкости, добавляют 1 - 2 мл 5%-го раствора хлорного железа (III) и нагревают на спиртовке. Раствор маслянокислого железа в отраженном свете приобретает буровато-коричневое окрашивание, а в проходящем свете - кроваво-красное. Реакция идет по уравнению:
3Са(СНзСН2СН2СОО)2 + 2FeCl3 = 2Fе(СНзСН2СН2СОО)3 + 3СаСl2
