Нингидрин реакциясы

Биурет реакциясы.

Жұмыстың мақсаты: Белок молекуласындағы пептидтік (- CO – NH -) байланыстарды ашу.

Жұмыс істеу реті: 2 пробирка алып біреуіне 5 тамшы 1%-дық жұмыртқа белогының ерітіндісін, екіншісіне 5 тамшы 1%-дық бидай белогының ерітіндісін құяды. Содан соң екі пробиркаға да 5 тамшыдан 10 %-дық NaOH ерітіндісін және 2-3 тамшыдан 1%-дық CuSO₄ ерітіндісін қосады. Екі пробиркадағы ерітінді де тұрақты күлгін-көк немесе қызыл-күлгін түске боялады. Бояудың түсі (қоюлығы) пептидтік байланыстың санына қарай өзгереді.

3. Зертханалық жұмыс

Нингидрин реакциясы.

Жұмыстың мақсаты: α-амин қышқылдарын анықтау.

Амин қышқылдарының судағы ерітінділерін нингидринмен қосып қыздырғанда күлгін-көк түсті бояу пайда болады, бояудың қоюлығы α-амин қышқылдарының концентрациясына байланысты. Ортаның рН>5 жоғары болғанда реакция екі сатыда жүреді.

Ι-ші саты. Амин қышқылдарын тотықтыра аминсіздендіру нәтижесінде нингидрин тотықсызданады. Бұл реакцияда аминқышқылдарының тотықсыздануы қатар жүреді:

тотықсызданған нингидрин

ΙΙ-ші саты. Түзілген аммиак тотыққан және тотықсызданған нингидриннің эквимолярлы мөлшерімен әрекеттесіп күлгін-көк түсті өнім (Руэманн көгі) түзеді:

Руэманн көгі

Нингидрин реакциясына амин тобы бар басқа да заттар (белоктар, аммиак) түседі, бірақ бұл кезде СО₂ бөлінбейді. Көміртек (IV) оксидінің бөлінуі тек α-амин қышқылдарына ғана тән ерекшелік. Хромотографияда бұл реакция амин қышқылдарын анықтау үшін қолданылады.

Жұмыс істеу реті: Үш пробирка алып оның біріншісіне 5 тамшы 1%-дық жұмыртқа белогын, екіншісіне 5 тамшы 1%-дық бидай белогын, ал үшіншісіне 5 тамшы 0,1%-дық глицин ерітіндісін құяды. Содан соң әрбір пробиркаға 2-3 тамшыдан 0,1%-дық нингидрин ерітіндісін қосып қайнатады, 1-2 минуттан кейін ерітіндінің түсі қызғылт артынан көк түске ауысады. Пробиркалардағы ерітінділердің түстерін салыстыра отырып қорытынды жасаңыз.

4. Зертханалық жұмыс