double arrow

Реактивы. 3. Трихлоруксусная кислота

1. Пикриновая кислота.

2. Натрий едкий.

3. Трихлоруксусная кислота

4. Калибратор – 177мкмоль/л

Ход определения концентрации креатинина в сыворотке крови.

1. Подготовка образцов к анализу:

К 0,5 мл исследуемого образца добавте 1,0 мл дистиллированной воды и 0,5 мл реагента №3. Содержимое пробирок перемешайте и через 10 минут центрифугируйте при 900g в течении 15минут. Для дальнейшего анализа используйте прозрачную надосадочную жидкость (супернатант).

Поставляемый в составе набора калибратор в данной процедуре не нуждается, так как она уже была роведена на предприятии – изготовителе.

Для приготовления контрольного раствора смешайте 0,5 мл реагента №3 и 1,5 мл дистиллированной воды (центрифугировать необязательно).

2. Проведение анализа:

Подготовте пробы следующего состава: Опытная проба Калибровочная проба Контрольная проба
Супернатант, мл 1,0 -- --
Калибратор, мл -- 1,0 --
Контрольный раствор, мл -- -- 1,0
Реагент №2, мл 0,5 0,5 0,5
Реагент №1, мл 0,5 0,5 0,5

Содержимое пробирок тщательно перемешайте и инкубируйте при температуре 18-25 0 С точно 20 минут. Фотометрируйте опытную и калибровочную пробы против контрольной пробы при длине волны 505 нм (490 – 520нм).

Мочу, требующую депротеинизации, можно исследовать не проводя этап подготовки к анализу. В этом случае мочу следует развести не в 100, а в 400 раз (1:399) и далее 1 мл ее использовать как супернатант. Ход анализа и расчет при этом не изменяется.

РАСЧЕТ концентрации (С) креатинина проведите по формулам:

Креатинин сыворотки / плазмы крови: С= (Епробы кал) х 177 (мкмоль/л)

Креатинин мочи: С= (Епробы кал) х 177х100/1000=(Епробы кал) х 17,7(ммоль/л)

или С=(Епробы кал) х 17,7хV(ммоль/сутки),

Где Е пробы – оптическая плотность исследуемой пробы,

Е кал – оптическая плотность калибровочной пробы,

177мкмоль/л – концентрация кретинина в калибраторе,

100 – разведение мочи,

1000 – перевод мкмоль в ммоль,

V – объем суточной мочи, л.

Содержание креатинина в сывороткекрови здоровых людей (норма): у женщин –

53-97 мкмоль/л, у мужчин - 61-115 мкмоль/л, у новорожденных ' (1-4-е сут) - 27-28 мкмоль/л, у детейдо года - 18-35 мкмоль/л, у детей стар­ше года 27-62 мкмоль/л, у подростков - 44-88 мкмоль/л.

Суммарное количество выделенного креатинина у здоровых мужчин со­ставляет 8,8-17,6 ммоль/сут, т.е. 1-2 г/сут, а у женщин — 7,4-15 ммоль/сут, т.е. 0,8-1,5 г/сут.


Понравилась статья? Добавь ее в закладку (CTRL+D) и не забудь поделиться с друзьями:  



Сейчас читают про: