Препараты гормонов

Препараты щитовидной железы

■ г, V

{^Тиреоидин (Thyreoidinum). Щитовидные железы убойного скота измельчают в мясорубке-волчке, полученную кашицу раскладывают в плоские эмалированные подносы и высушивают в вакуум-сушильном шкафу при температуре не выше 40°С. Сухую массу порошкуют, обез­жириваю т бензином в аппарат е Сокслета, вновь сушат и пр евраща ют в порошшГв шаровой мельнице. 1аким ооразом, тиреоидин сухой пред-ставляет соббн выс ушеннукГТцитовидную желез у (glandula thyreoidea siccata), прошедшукГтолько ооезжиривание. Производство тиреоидина может служить типовой схемий производства первой группы органо­препаратов высушенных, обезжиренных и испорошкованных желез. Препарат представляет собой мелкий аморфный порошок желто-серого цвета со своеобразным запахом. Нерастворим в воде и спирте. Стан­дартизируют по содержанию йода, которого в препарате должно быть от 0,17 до 0,23%. При необходимости препарат разбавляют молочным сахаром. Упаковывают в банки оранжевого стекла и сохраняют в су­хом прохладном помещении. Список Б. 0,3—0,1 г. Применяется в по­рошках и таблетках при недостаточной функции щитовидной железы.

16*

Препараты паращитовидных желез

Паратиреоидин (Parathyreoidinum). Препарат получают из желез убойных животных, которые измельчают в мясорубке и подвергают гидролизу слабым раствором хлористоводородной кислоты. Охлажден­ный гидролизат фильтруют, затем при рН 4,8—4,9 осаждают белковую фракцию и осадок растворяют в воде. Раствор насыщают хлоридом натрия, высалившееся вещество отделяют центрифугированием, раст­воряют в воде и снова осаждают при рН 4,8—4,9. Очищенное таким образом вещество растворяют в воде, раствор стандартизируют на собаках по свойству повышать содержание кальция в крови, затем консервируют 0,25—0,3% раствором фенола и в асептических условиях разливают в ампулы по 1 мл и во флаконы по 5 и 10 мл. Паратиреои­дин относится к третьей группе органопрепаратов, очищенных от бал­ластных веществ вытяжек, пригодных для подкожных и внутримышеч­ных инъекций (и, разумеется, для перорального применения). Препа­рат представляет собой прозрачную или слабоопалесцирующую жид­кость светло-янтарного цвета, кислой реакции (рН 2,5—3,0); 1 мл препарата содержит 20 ед. Применяется при различных формах тета­нии, спазмофилии, рекомендуется при бронхиальной астме и крапив­нице. Список Б. 5—15 мл.

Препараты надпочечников

gj, Адреналина гидрохлорид и гидротартрат (Solutio Adrenalini hydroch-loridi 0,1%; Solutio Adrenalini hydrotartratis 0,2%)- Для получения адреналина применяют надпочечники преимущественно крупного рога­того скота. При этом учитывают, что адреналин как производное пирокатехина весьма быстро окисляется в водном растворе, причем продукты, окисления я^о^ йТБи_;ЛтзЗТбму надпочечные же~л~езы долж1Ш быть извлечены немедленнб~~после убоя и в течение первого получаса направлены в производство или заморожены. Измельчают железы в мясорубке из нержавеющей стали или покрытой эмалью, после чего полученный фарш помещают в экстрактор, эмалированный внутри и заливают полуторным количеством 95% спирта, к которому добавляют 1 % щавелевой кислоты (адреналин ничтожно мало растворим в воде— 1:10 000, но хорошо растворим в разведенных кислотах). Экстрагиро­вание проводят при комнатной температуре и непрерывно работаю­щей мешалке в течение 12 ч. По некоторым методам экстрагирование рекомендуется проводить в восстанавливающей среде с добавлением цинковой пыли. Полученную вытяжку выводят из аппарата с помощью сифона, после чего операцию экстрагирования повторяют. Вторую вы­тяжку и отжим после прессования соединяют с первой вытяжкой и выпа­ривают в вакуум-аппарате при температуре не выше 40°С до объема, равного Vio исходного количества вытяжки. Рекомендуется также выпа­ривание проводить в токе углекислоты. Водный остаток освобождают от липоидов и жировых веществ выбалтыванием с бензином, после чего из вытяжки в вакуум-аппарате отгоняют остатки бензина. Затем вы­тяжку фильтруют и, добавляя раствор аммиака (до рН 9,0), осаждают адреналин — основание в виде игольчатых кристаллов. Осадок соби­рают на фильтре и промывают водой.

Полученный сырой адреналин с целью очистки растворяют в под­кисленной хлористоводородной кислотой воде и вновь осаждают раст­вором аммиака. Осадок собирают на фильтре, промывают водой, затем спиртом и эфиром. Чистый и просушенный адреналин растворяют в 0,01 н. растворе хлористоводородной кислоты в концентрации 1: 1000, к раствору добавляют 0,5% хлорэтона в качестве консерванта и после

фильтрования в асептических условиях разливают в ампулы или склян­ки из оранжевого стекла емкостью 30 мл, заполняя их доверху. Вы­пускался также в ампулах по 1 мл, но сейчас для ампулирования стали использовать гидротартрат адреналина,^растворы которого более стойки. Поскольку относительная молекулярная масса гидротартрата адреналина больше, чем гидрохлорида адреналина, его растворы при­готовляют в более высокой концентрации 0,2%).

Препарат представляет собой бесцветную или слегка желтоватую жидкость кислой реакции (рН 3,0—4,0). Разрешается употреблять слегка порозовевшие растворы. Растворы, побуревшие или содержащие осадок, к употреблению непригодны. Сохраняется в защищенном от света месте. Применяется как местное сосудосуживающее и кровооста­навливающее средство, как стимулятор сердечно-сосудистой системы (при коллапсе), при бронхиальной астме для расслабления бронхиаль­ной мускулатуры. Список Б.

Кортин (Cortinum). Водный раствор очищенного экстракта коры» надпочечников. Отделяют корковую часть железы, измельчают ее и⁽подвергают экстрагированию эфиром, далее гормоны переводят в спирт, а затем в изотонический раствор хлорида натрия. Препарат обладает биологическими свойствами гормонов коры надпочечников (регулиро­вание минерального, углеводного и белкового обмена). Выпускается в ампулах по 1 мл активностью 10 ЕД в 1 мл. Применяется при лече­нии болезни Аддисона, миастении, o6aieft адинамии. Сохраняется в защищенном от света месте при температуре не выше 10 °С. Технологическая схема комплексной переработки надпочечников. Полученный из надпочечников фарш смешивают с сухим льдом и оставляют на 36 ч при —2°С. Этим достигается разрыв клеток тканей железы, чем в значительной степени интенсифицируется последующий экстракционный процесс. Экстрагирование проводят подкисленным спиртом 2 или 3 раза. Из объединенных вытяжек сначала под вакуу­мом отгоняют спирт, после чего упаривают водный остаток до 'As пер­воначального объема при температуре не выше 40 °С. Слитый кубовый остаток смешивают с 3 частями охлажденного ацетона и оставляют на 18—20 ч при температуре 0—5°С. Отделяют жидкость от осадка и из нее под вакуумом отгоняют ацетон. С целью дальнейшей очистки водную вытяжку еще раз подвергают отстаиванию на холоду (при 5—10°С). Вытяжку отделяют от остатка, а остаток промывают 50% спиртом. Эти спиртовые смывы, а также смыв из куба после отгонки спирта (см. выше) соединяют и из смеси под вакуумом отгоняют спирт. Водный остаток фильтруют, фильтрат обрабатывают охлажденным ацетоном. Осадок отбрасывают, а водную часть концентрируют под вакуумом и присоединяют к основной вытяжке. Эту вытяжку охлажда­ют и 3—4 раза экстрагируют дихлорэтаном из расчета 3 л на 10 л вытяжки. При этом в дихлорэтан переходят кортикостероиды, а в вод­ной фазе остается основная масса адреналина.

Дихлорэтановые извлечения взбалтывают с небольшим количеством воды, после чего смесь помещают на 10—12 ч в холодильник при тем­пературе от —10 до —15 °С. Отделившийся водный слой (содержащий некоторое количество адреналина) при этом замерзает в виде корочки, хорошо отделяемой от дихлорэтанового извлечения, которое выпари­вают под вакуумом до полного удаления дихлорэтана. Остаток раство­ряют в 70% спирте и оставляют при 0°С в течение 10—12 ч. Спиртовую жидкость фильтруют через бумагу и 3—4 раза обрабатывают петро-лейным эфиром. Из очищенного спиртового раствора далее под ваку­умом удаляют спирт, а остаток (сиропообразная масса) растворяют в изотоническом растворе хлорида натрия, консервированного 10% эти­лового спирта. Этой же жидкостью разбавляют раствор из расчета

получения 1 л из 25 кг надпочечников свиней и из 40 кг надпочечников крупного рогатого скота. После этого рН раствора доводят до 4,2—4,5 и с целью окончательной очистки еще раз выдерживают при 2—5°С. После стандартизации фильтруют через бактериальный фильтр и с соблюдением правил асептики разливают в ампулы.

Для получения адреналина водную вытяжку (отделенную от дихлор­этана и после вымораживания) подщелачивают 25% раствором ам­миака до рН 9,2. При этом выпадает адреналин, для полноты осажде­ния которого жидкость отстаивают в течение суток при 10—12 °С. Кристаллы адреналина собирают на воронке Бюхнера, где промывают крепким спиртом, а затем эфиром. Полученный адреналин-сырец да­лее очищают (см. выше) и переводят в официнальный раствор гид­рохлорида адреналина или в гидротартрат.

Препараты поджелудочной железы

рр рру ^^_^^^^^£р_ Инсулин нерастворим в спирте крепостью выше 90%, поэтому выпа­дает при этом в осадок. Его отделяют центрифугированием и с целью дальнейшей очистки растворяют в воде, подкисленной хлористоводо­родной кислотой (рН 3,0), осторожно осаждают 2 н. раствором едкого натра при изоэлектрической точке (рН 5,0). Кристаллический осадок инсулина собирают на воронке Бюхнера, где его промывают вначале крепким спиртом, а затем эфиром. После стандартизации препарата на кроликах из него приготовляют официнальный раствор •— Insulinum pro injectionibus — путем раство­рения в воде подкисленной хлористоводородной кислотой до рН 3,0— 3,5. Раствор профильтровывают через бактериальный фильтр, добав­ляют 1,6-—1,8% глицерина и 0,25—0,3% фенола в качестве консерван­та и в асептических условиях разливают во флаконы по 5 мл. Флако­ны закрывают резиновыми пробками, которые обкатывают алюминие­выми колпачками. Препарат представляет собой прозрачную бесцветную или желтова­тую жидкость кислой реакции, не содержащую осадка; 1 мл раствора 246 О

* Инсулин (Insulinurn). Препарат, содержащий одноименный гормон. Исходным сырьем являются поджелудочные железы крупного рога­того скота и свиней, у которых они наиоолее крупны. Свежие или замороженные железы пропускают через мясорубку и залива ют пол у-торным количеством 95% спирта, подкисле нного серной кислотой (0,5%). Подкисд енныйспирт ин активирует находящийся в гюджелу-дочной железе фермент трипсин, благ одаря чему удается~~сохрШ ТОть инсулин в неизмененном сис шкЯии. Легкая разрушаемость инсулина трийсином была причиной Неудач первых исследователей инсулина при их попытках извлечь этот гормон экстрагированием желез водой. Настаивание с подкисленным спиртом проводят при частом перемеши­вании в течение Р/2 ч, после чего вытяжку сливают, а остаток после отжима на прессе заливают 1 частью 60% спирта и снова настаивают в течение часа. Обе вытяжки сливают и оставляют на 48 ч на хол оду (0—4°r.)jj jg пгд об ождения от белков. Выпавший осадок отделяют центрифугированием7~а фильтр_ ат выпаривают в эмалированном ва­куум-аппарате при температуре,30—J35J4J До остатка, равного "при-мерно '/ щ исходной вытяж ки. Дал ее жицкост ь~ооезжиривают jyrgTaH-ванием на _холоду, после чего ее фильтруют ]^_насыщают сульфатом аммония~"(50—55%). Поскольку __ин _сулин явл яется__белком. он легко при"этом вьгсаливается, образуя на поверхности корку~сыр"6п5~йнсу-лдща. Инсулин-сырец отделяют от маточной жидкости центр¥футщгойа"-нием, после чего его растворяют__в_,5й%_сщщте _и после отдел ения, не-растворимых веществ к раствору добавля^т^6^^ И

содержит 20, 40 или 60 ЕД. Сохраняется в прохладном месте (1 — 10°С). Относится к списку Б. Вводится подкожно, так как легкая разрушаемость инсулина протеолитическими ферментами делает не­возможным введение его больным перорально. Но и при парентераль­ном введении инсулин довольно быстро исчезает из крови, вероятно, вследствие разрушения его тканевыми ферментами.

Пролонгированные препараты инсулина. Поскольку общая продол­жительность действия однократной дозы инсулина невелика (6—8 ч), при регулярном применении инсулина целесообразнее пользоваться его лекарственными формами (суспензиями), обладающими свойством оказывать продленное действие. Пролонгирование достигается добав­лением солей цинка, белка (протамин) и буфера, которые меняют скорость наступления сахаропонижающего действия, «пика» действия и общую продолжительность действия.

Все суспензии приготовляются из кристаллического инсулина с ак­тивностью не менее 22—23 ЕД в 1 мг. В 1 мл суспензии содержится 40 или 80 ЕД. Суспензию цинк-инсулина приготовляют путем смеше­ния 3 объемов суспензии цинк-инсулина аморфного с 7 объемами сус­пензии цинк-инсулина кристаллического. Протамин — белок, добывае­мый из молок осетра, содержит до 80% лейцина, аргинина и гистидина, в связи с чем обладает щелочным характером. Для консервирования на каждые 100 мл добавляют: в суспензию цинк-инсулина—0,25—0,3 г фенола, а в суспензию протамин-цинк-инсулина, помимо того, 1,4—1,8 г глицерина. Все суспензии белого или почти белого цвета. При стоянии взвесь оседает, но при встряхивании легко взмучивается. Надосадочная жидкость бесцветная и прозрачная. Суспензии инсулина отпускаются во флаконах по 5 мл из нейтрального стекла, укупоренных резиновы­ми пробками с металлической обкаткой. Замерзание также недопу­стимо. Список Б.

Препараты половых гормонов

Женские половые гормоны, вырабатываемые яичниками, являются производными углеводорода эстрана; важнейшие из них — эстрон (фолликулин) и эстрадиол. Мужские половые гормоны, вырабатывае­мые семенниками, являются производными другого углеводорода — андростана; важнейший из них — тестостерон. По химическому строе­нию женские и мужские половые гормоны относятся к стероидным гормонам и близки друг к другу.

Ввиду трудности получения их в достаточном количестве из биоло­гического материала в настоящее время в медицинской практике ши­роко применяются синтетические мужские и женские половые гормоны или их аналоги (этинил-эстрадиол, синэстрол, диэтилстильбэстрол, ме-тилтестостерон и др.). Из официнальных препаратов половых гормо­нов, вырабатываемых пока из биологического материала, можно на­звать только препараты женских половых гормонов.

Эстрон (Oestronum). В яичниках убойного скота имеется незначи­тельное количество фолликулярных гормонов. По доступности и деше­визне наиболее выгодным видом сырья может служить моча, которую собирают от специальных доноров (беременные женщины или бере­менные животные). Мочу подкисляют хлористоводородной кислотой и экстрагируют бензолом или эфиром. Эту операцию проводят в за­крытом эмалированном экстракторе при непрерывно работающей ме­шалке. Эфирную или бензольную вытяжку отделяют от водного слоя и выпаривают. Остаток растворяют в спирте, спиртовой раствор вы­мораживают, освобождая его от примесей, затем фильтруют и филь­трат выпаривают. Остаток извлекают эфиром, эфир отгоняют, а оста-

ток подвергают специальной очистке. В результате получается белый кристаллический порошок гормона. Эстрон является стандартом для всех препаратов женских половых гормонов. За 1 ЕД принимают спе­цифическую активность (способность вызывать течку у кастрированных самок грызунов) 0,0001 мг эстрона. Препарат выпускается в виде раствора в растительном масле (Solutio Oestronum oleosa) no 1 мл для внутримышечных инъекций, содержащего 0,5 мг или 1 мг эстрона (т. е. с активностью 5000 или 10 000 ЕД).

Эстрадиол-бензоат (Oestradioli benzoas). Эстрадиол в виде бензоата мало разрушается в тканях организма, медленно всасывается, медлен­но выделяется и оказывает поэтому более длительное действие (инъ­екция 1 раз в 3—5 дней), чем раствор эстрона (инъекция 1 раз в день). Выпускается в виде 0,1% масляного раствора (Solutio Oestradioli ben-zoatis oleosa) в ампулах по 1 мл для внутримышечных инъекций; 1 мл содержит 10 000 ЕД. Такое же продолжительное действие оказы­вает эстрадиол-дипропионат, применяемый в виде 0,1% масляного раствора (Solutio Oestradioli dipropionatis oleosa).

Препараты женских половых гормонов применяются при недостаточ­ной внутрисекреторной функции яичников и связанным с этим общим и половым недоразвитием, при климаксе. Все они относятся к спис­ку Б.

Препараты гипофиза

Гипофиз (придаток мозга) состоит из передней и задней долей, вы­рабатывающих совершенно разные гормоны. Гормоны передней доли оказывают влияние на рост организма, углеводный и жировой обмен и разнообразное воздействие на другие эндокринные железы. Задняя доля гипофиза также является местом выработки нескольких важных гормонов, влияющих на мочеотделение, кровяное давление, гладкую мускулатуру (особенно матки), а также на углеводный обмен. Гор­моны гипофиза являются белковыми веществами и под действием про-теолитических ферментов теряют свою активность.

ПРЕПАРАТЫ ПЕРЕДНЕЙ ДОЛИ ГИПОФИЗА. Из передней доли гипофизов убойного скота вырабатываются препараты: 1) кортикотро-пин для инъекций или адренокортикотропный гормон для инъекций — АКТГ (Corticotropinum pro injectionibus, Hormonum adrenocorticotropi-num pro injectionibus) и 2) пролактин (Prolactinum). Производство их протекает одновременно по современной технологической схеме, раз­работанной Г. К. Коротаевым и В. А. Лившицем (ВНИИ технологии кровезаменителей и гормональных препаратов). Для этого фарш, по­лучаемый из свежезамороженных передних долей железы, смешивают с двумя частями воды, затем прибавляют 8 частей ацетона, подкислен­ного хлористоводородной кислотой, и мацерируют в течение 1,5 часа при перемешивании. Извлечение отделяют от жмыха на сепараторе. Из прозрачной вытяжки активные вещества осаждают повышением концентрации ацетона до 90% и отстаиванием в течение ночи на холо­ду (не выше—0°). Маточник отсасывают, осадок промывают на нутч-фильтре ацетоном, и высушивают.

Пролактин. Кислый ацетонированный порошок растворяют в 0,6% растворе уксусной кислоты из расчета 50 г в 1 л раствора. Устанавли­вают рН в растворе с помощью 10% раствора едкого натра до 2,8—3,0. Раствор мутнеет; выпадение лактина активизируют добавлением на­сыщенного раствора натрия хлорида (60 мл на 1 л) и отстаиванием в течение 3 часов. Осадок отделяют центрифугированием и высушивают. После стандартизации приготовляют водный раствор, профильтровы­вают через бактериальный фильтр и ампулируют по 1 мл. Препарат

способствует увеличению выделения молока молочными железами в

послеродовом периоде.

[кортикотропин. В растворе после отделения лактина устанавливают рН 5,5 с помощью водного аммиака и отстаивают в течение ночи при температуре 10—15°. Выпавший осадок отделяют центрифугированием и отбрасывают. Раствор разбавляют водой в десять раз и пропускают через колонну, заполненную КМ-сефадексом К-25 (катионит КМ-сефа-декс предварительно уравновешивают 0,1 н. аммоний-ацетатным бу­фером рН 5,5). Скорость протекания раствора через колонну поддер­живают в пределах 100—120 см/час. По окончании процесса колонну промывают 0,1 н. аммоний-ацетатным буфером рН 5,5. Кортикотропин десорбируют с КМ-сефадекса, пропуская через колонну 2 М аммоний-ацетатный буфер рН 6,2. В полученный элюат добавляют цистеингид-рохлорид из расчета 1 г на 1 л. Раствор помещают в термостат и вы­держивают 20 часов при 90°. Горячий раствор фильтруют через фильтр Зейтца, охлаждают и выливают в охлажденный до 3—5° спирт. Для отстаивания осадка раствор оставляют на ночь на холоду. Осадок отделяют центрифугированием. Окончательную очистку кортикотропи-на осуществляют с помощью хроматографии на сефадексе Г-25. Для этого высушенный спиртовой осадок растворяют в 0,6% растворе ук­сусной кислоты (1 г в 0,1 л). Раствор наносят на колонну, заполненную сефадексом Г-25, и элюируют 0,6% раствором уксусной кислоты. По­явление кортикотропина в элюате регистрируется проточным спектро­фотометром. Фракцию, содержащую кортикотропин, заливают в лотки, замораживают и лиофильно высушивают. Высушенный порошок стан­дартизуют и используют для приготовления лекарственных форм:

1) жортикотропин для инъекций (Cortkotropinum;pro injectionibus) и

2) суспензия цинк-кортикотропина для инъекции (Suspensio Zinc-cor-
ticotropini).

Кортикотропин для инъекций представляет собой стерильный лиофи-лизированный порошок белого цвета, который ex tempore растворяют в 0,9% растворе хлорида натрия. Выпускают по 10, 20 и 40 ЕД во флаконе с добавлением наполнителя.

Кортикотропин для инъекций готовят растворением препарата и на­полнителя в воде для инъекций. Раствор фильтруют через бактериаль­ные фильтры в асептических условиях, разливают по 0,5 мл во флаконы емкостью 5 мл и сублимируют. Высушенные флаконы закрывают ре­зиновыми пробками и обкатывают металлическими колпачками.

Суспензия цинк-кортикотропина для инъекций выпускается во фла­конах по 5 мл и содержит 100 ЕД во флаконе, является препаратом с продленным действием. Препарат представляет собой тонкую суспен­зию белого цвета, не содержащую крупных, не разбивающихся при встряхивании частиц. При стоянии взвесь оседает, жидкость над осад­ком бесцветная и прозрачная. Приготавливают суспензию растворением кортикотропина в 0,01 н. растворе хлористоводородной кислоты с по­следующим добавлением хлористого цинка, консерванта (нипагина) и раствора едкого натра до рН 7,5—8,0.

ПРЕПАРАТЫ ГОНАДОТРОПНЫХ ГОРМОНОВ. Гонадотропин хо-рионический (Gonadotropinum chorionicum). Препарат, содержащий гонадотропные гормоны, получаемый не из желез, а из мочи беремен­ных женщин. Получаемую через клиники и консультации свежую мочу женщин в первой половине беременности подкисляют уксусной кисло­той до слабокислой реакции, фильтруют и упаривают в вакуум-аппа­рате при температуре не выше 35—40 °С до 'До исходного объема. К полученному остатку после охлаждения добавляют 4 объема 95% спирта. Выпадает обильный осадок, который переносят на фильтр, промывают спиртом и эфиром. Полученный гормон-сырец подвергают

очистке, которая может быть проведена разными способами. По одно­му из них сырец растворяют в десятикратном объеме воды и центри­фугируют. К раствору добавляют реактив, состоящий из хлорида аШ- мония и хлорида магния, а затем раствор аммиака до щелочной реакции для осажденной фосфатом мочи. Осадок отфильтровывают, а к раствору добавляют 4 объема спирта. Образовавшийся осадок со­бирают на фильтре, промывают спиртом, эфиром, а затем высушивают в эксикаторе над серной кислотой или хлоридом кальция и стандарти­зируют на неполовозрелых крысах-самцах. Далее приготовление раст­воров с содержанием 500, 1000 или 2000 ЕД во флаконе проводят по схеме, описанной для АКТГ. Препарат представляет собой стерильный лиофилизированный порошок, который ex tempore растворяют в 0,9% растворе хлорида натрия.

Препарат содержит лютеинизирующий гормон, способствующий у женщин переходу развитого фолликула в желтое тело и удлиняющий время его существования, а у мужчин — стимулирующий функцию ин-терстициальных клеток семенников. Назначается внутримышечно. Спи­сок Б.

ПРЕПАРАТЫ ЗАДНЕЙ ДОЛИ ГИПОФИЗА. Адиурекрин (Adiure crinum). Приготовляется из задней доли гипофиза убойного скота. В препарате содержатся все гормоны, вырабатываемые задней долей гипофиза, в частности антидиуретический гормон, действующий на водно-солевой обмен. Вследствие быстрой потери активности гипофизы тотчас после убоя скота погружают в ацетон для консервирования. Перед производством гипофизы вынимают из ацетона и отделяют зад­нюю часть. Изрезанное сырье раскладывают на эмалированные под­носы и высушивают в вакуум-сушильном шкафу при температуре не выше 40 °С. Высушенную массу затем обезжиривают бензином в аппа­рате Сокслета. Остатки экстрагента удаляют высушиванием массы под вакуумом, после чего ее порошкуют в шаровой мельнице и стандар­тизуют на матке, взятой от девственной морской свинки. Таким обра­зом, препарат представляет собой высушенные и испорошкованные железы, прошедшие только обезжиривание (Pulvis posterioris glandulae pituitariae). Это мелкий аморфный порошок сероватого цвета, нераст­воримый в воде и других обычных растворителях: 1 мг препарата со­держит 1 ЕД. Сохраняется в хорошо закупоренных банках, в сухом прохладном месте.

Применяется при несахарном мочеизнурении и ночном недержании мочи. Вводится в ноздрю путем легкого вдыхания (понюшки) в коли­честве 0,03—0,05 г. Список Б.

Питуитрин (Pituitrinum). Приготовляется из адиурекрина, для чего его дважды настаивают на 0,25% растворе уксусной кислоты при тем­пературе 40 °С при частом помешивании. Соединенные вытяжки филь­труют и из фильтрата удаляют белки с помощью диализованного рас­твора хлорокиси железа. Осадок отфильтровывают и для удаления избытка железа к фильтрату добавляют гидрокарбонат натрия до сла­бощелочной реакции. Жидкость фильтруют, добавляют уксусной кис­лоты до рН 3,0—4,0, консервируют 0,3% фенола и в асептических ус­ловиях разливают в ампулы по 1 мл. Препарат представляет собой прозрачную бесцветную жидкость кислой реакции. В 1 мл препарата содержится 5 или 10 ЕД. Применяется для усиления родовых потуг, при послеродовых кровотечениях. Действие обусловливается находя­щимися в препарате гормонами: окситоцином, повышающим тонус гладкой мускулатуры, и вазопрессином, вызывающим сужение кро­веносных сосудов. Назначается также при несахарном мочеизнурении и ночном недержании мочи. Список Б. Вводится подкожно или внутри­мышечно 5—10 ЕД.

Препараты ферментов Ферментами называютс я специфические бе лки, входящие в состав клеток и тканей животных организмов и играющие р оль биологиче- ских катализаторов. К наиболее характерным свойствам ферментов относятся__^^2молд_-бильность, чувствительно сть к изменению рррутчдм гррд" ч яркпвыря- П 50 °С

р р рр

женная специфичность действия.. При нагревании свыше 50 °С актив­ность ферментов заметно падает, а при 80°С они обычно полностью утрачивают свои каталитические свойства. На степень инактивирования фермента влияет и длительность термического воздействия. Для боль­шинства ферментов, выделенных из клеток и тканей животных, опти­мальной является температура 37—40 °С. Активность ферментов резко меняется в зависимости от рН среды. Оптимальное значение рН среды неодинаково для различных ферментов. Каждый фермент, как прави­ло, действует лишь на вполне определенный субстрат или же тип химической связи в молекуле.

,- Ферменты слизистой оболочки желудка

I Ч1епсин (Pepsinum). Добывают из свиных желудков, для чего слизи-, сту ю оболочку вместе с подслизисты м слоем отделяют от прочих""тка~ ^ ней, промываю т теплой во дой (не выше 40 °С), из мельчают н а_мясд-рубке и в эмалированном или фарфоровом сосуде заливают 0~|5% раствором хлористоводоро дной кисл оты из расче та 4 части экстрагента" на 1~тгасть слизистой м~ассы. Смесь настаивают в течение 18 ч при

температур е 40°С. часто помешива я, после чего прп пускяют__ аерез

полотно и фильтрат обезжиривают, дважды взбалтыв. ал.£ш с бензином

или эфиром. '------- " ' ~"~ ~~

Л. С. Казарновский, В. Н. Солонько и Л. А. Шинянский д ля экстрак-, ции пеп сина применили ультразвук.

Измельченный материал помещают в сосуд с водным раствором хлористоводород­ной кислоты (0,5%) при соотношении 1:4. Сосуд опускают в ванну, заполненную трансформаторным маслом, и после 5-минутного воздействия ультразвука (частота 500 кГц, интенсивность 9 Вт/см*²) жидкость из сосуда сливают, а остаток снова зали­вают 0,5% раствором хлористоводородной кислоты при соотношении 1: 2 и подвергают воздействию ультразвука в течение 3 мин.

Дальнейшая обработка может идти по-разному. В наиболее простом варианте водную вытяжку пепсина выпаривают под вакуумом при температуре не выше 40 °С до консистенции густоватого экстракта, после чего полученную массу смешивают с мо­лочным сахаром. Значительно лучше, если пепсин будет освобожден от сопровождаю- • щих его веществ. Для этого к водной вытяжке добавляют 0,1 н. раствор аммиака до слабощелочной реакции, а затем фосфатную взвесь с одновременным добавлением рас­твора аммиака с целью сохранения слабощелочной реакции. Фосфатная взвесь полу­чается смешением 10% раствора хлорида кальция с равным объемом 5,5% раствора двузамещенного фосфата натрия. После добавления фосфатной взвеси жидкость пере­мешивают и оставляют на 5—6 ч. При этом пепсин, выделенный из раствора при помощи аммиака, адсорбируется на поверхности тончайшей взвеси фосфата кальция Саз(РО4)г и вместе с ним выпадает в осадок. Во избежание элюирования, т. е. обрат­ного перехода фермента в раствор, повторно добавляют аммиак, чтобы сохранить необходимую реакцию среды. Отстоявшуюся жидкость сливают с осадка сифонирова-нием, осадок взмучивают с дистиллированной водой, декантируют, после чего перево­дят на нутч-фильтр и после промывки отсасывают. Осадок обрабатывают 4% раство­ром щавелевой кислоты. При этом фосфат кальция переходит в нерастворимый окса-лат кальция, а пепсин растворяется. Раствор пепсина фильтруют, осадок промывают водой, нромывные воды присоединяют к фильтрату, после чего добавляют такое ко­личество 1 н. раствора аммиака, чтобы жидкость имела рН 2,4—2,6. Далее добавля­ют пятикратный объем спиртоэфирной смеси (спирта и эфира поровну). Выпадает белый осадок, который собирают на фильтре и здесь же промывают сначала неболь­шим количеством спиртоэфирной смеси, а затем эфиром. После промывки осадок бы­стро просыхает в токе теплого воздуха.

Кроме описанного адсорбционного метода, предложенного видней­шим отечественным биохимиком А. Я- Данилевским, очистка пепсина

может быть проведен а путем диализ а, а также высаливанием нейтраль­
ными ТШЕШ ~

После проверки переваривающей активности полученный пепсин раз­бавляют молочньш_сая*ром до активности 1: 100. Для этой же цели разрешается ТГрименять свекловичный сахар. Готовый препарат пред­ставляет собой белый или слегка желтоватый порошок кисловато-слад­кого вкуса со слабым своеобразным запахом. Полностью растворим в воде (коллоидно); раствор прозрачен или слегка мутноват, но не вы­деляет осадка. Реакция 2% раствора слабокислая (по фенолфталеину). Влаги в препарате должно быть не более 1%- Не должно быть пато­генной и гнилостной микрофлоры, сапрофитов допускается не более 2000 колоний в 1 г.

р у чистотой. С целью сохранности к полученному соку добавляют^ сали^ nn.nrvRy jn киглпту. п количеств 0,04= ^.0.04%. г~ "Готовый препарат представляет собой прозрачную бесцветную жид­кость кислого вкуса со слабым своеобразным запахом. Содержит белки, отчасти в виде нуклеопротеидов, ферменты —пепсин, химозин и липазу, а также хлористоводородную кислоту в количестве 0,5%; рН 0,8—1,0. Из неорганических веществ, кроме НС1, в натуральном желу­дочном соке содержатся хлориды (NaCl, KC1, NH4C1), фосфаты, суль­фаты и небольшое количество роданистого водорода. Желудочный сок расфасовывают в склянки по 100—150мл и сохраняют при температу­ре от 2 до 10 °С взащищенном от света месте. Срок годности 6 мес. При замораживании натурального желудочного сока появляется- оса­док пепсина, который снова растворяется в нем при комнатной темпе­ратуре. Применяется также искусственный желудочный сок (Succus gastricus artificialis), представляющий собой водный экстракт слизистой обо­лочки желудков свиней, подкисленный хлористоводородной кислотой. Препараты ферментов поджелудочной железы Панкреатин(Pancreatinum). Для получения панкреатина свежие или замороженные поджелудочные железы рогатого скота или свиней (предпочтительнее) измельчают в мясорубке, прессуют и отжатый сок осаждают спиртом. Осадок промывают спиртом, эфиром, сушат и

Препарат упаковывают в плотно закрывающиеся стеклянные банки
или в банки из белой жести со вложенным пергаментным мешком.
Сохраняется в сухом помещении при температуре от 2 до 15 °С. По
истечении года проверяется его активность. Пепсин в сочетании с гид­
рохлоридом бетаина (1+4) известен под названием ацидин-пепсина
(Acidin-pepsinum). Выпускается в таблетках по 0,5 и 0,25 г. В желудке
гидрохлорид бетаина легко гидролизуется и отделяет хлористоводород­
ную кислоту. ■*
У Желудочный сок. Пищеварительные соки животных и человека не­
обходимо рассматривать как естественные растворы ферментов, содер­
жащие меньшее количество, примргрйт-ч-а м игку^гтир-ы н^—получаемые
экстракты. При наличии разработанных методов их можно получать
в значительных количествах и применять в качестве лекарственных
препаратов. К числу таких препаратов должен быть отнесен натураль­
ный желу дочный cok _JSuccus gastricus naturalis), получаемый по ме­
тоду И. П. Павлова от здоровых собак. Для этой цели накладывают
желудочную фистулу в сочетании с эзофаготомией. Оперированные
таким образом собаки сохраняют способность проглатывать куски
мяса, но оно вместе со слюной вываливается через выведенный нару­
жу конец пищевода и в желудок не попадает. Вытекающий через фис­
тулу при таком «мнимом» кормлении й
С

растирают в порошок. Проверяют активность трипсина и разбавляют молочным сахаром до получения препарата с определенной актив­ностью—25 ЕД. Выход препарата может быть повышен, если измель­ченные железы вначале привести к определенной кислотности (рН 4,5), прибавляя буферную смесь, затем массу смешать с песком и подвер­гнуть прессованию. Протеолитическую активность препарата можно повысить за счет влияния энтерокиназы и иона ++Са(СаС1₂).

Препарат представляет собой порошок желтоватого цвета. В воде растворяется неполностью. При действии препарата на белок в слабо­щелочной среде он под влиянием трипсина расщепляется, теряя при­сущие ему физические свойства. Так, казеин теряет способность осаж­даться при подкислении раствора, а желатин — способность образовы­вать студень при охлаждении его раствора и вязкость. При действии препарата на крахмальный клейстер он под действием амилазы осаха-ривается, теряет коллоидные свойства и способность давать синее окрашивание с раствором йода. Сохраняется в стеклянных банках в сухом прохладном месте.

В форме порошка или таблеток применяется при ахилии, панкреати­тах и расстройствах пищеварения, связанных с нарушением функции печени и поджелудочной железы.

Протеолитин (Proteolytinum). Препарат, предназначенный для глу­бокого расщепления белка; содержит комплекс ферментов поджелу­дочной железы. Свежую поджелудочную железу свиней промывают изотоническим раствором хлорида натрия (стерильным) и медленно замораживают при —16—17 °С. Для получения протеолитина исполь­зуют железу с различным сроком хранения: от 2 ч до 90 сут. Оттаива­ние производят при комнатной температуре не менее 2 ч. После оттаи­вания измельчают железу в электромясорубке «Волчок». К измельчен­ной массе прибавляют полуторное количество свежеперегнанной ди­стиллированной воды (по массе) и 10% толуола, взбалтывают 30 мин, оставляют на 5—6 ч при 0—5°С, фильтруют через мелкопористую сет­ку из нержавеющей стали, фильтрат разливают в стерильные флаконы по 10 мл и быстро замораживают. Высушивание препарата из замо­роженного состояния производят методом сублимации при глубоком вакууме до остаточной влажности 5—6%.

Трипсин кристаллический (Trypsinum crystallisatum). Фермент, выде­ленный из поджелудочной железы в чистом виде. Применяется для облегчения удаления вязких секретов и экссудатов при воспалительных заболеваниях дыхательных путей (ингаляции), тромбофлебитах и ос­теомиелитах (внутримышечные инъекции), в офтальмологии — при иритах, иридоциклитах и др. (глазные капли).

Химопсин (Chimopsinum). Препарат поджелудочной железы, содер­жащий, помимо трипсина, фермент а-химотрипсин. Применяется, при лечении гнойных ран, пролежней, ожогов II степени (растворы в 0,25% растворе новокаина), в офтальмологии — при кератитах и язвах рого­вицы (ванночки с раствором и глазные капли).

Абомин (Abominum). Препарат из сычуга телят и ягнят молочного возраста, содержит сумму протеолитических ферментов желудочно-кишечного тракта. Применяется в форме таблеток по 0,2 г при забо­леваниях желудочно-кишечного тракта, сопровождающихся наруше­нием переваривающей способности и понижением кислотности желу­дочного сока (гастриты, гастроэнтериты, энтероколиты и др.).

Инкрепан (Increpanum). Сухой экстракт, получаемый из поджелу­дочной железы крупного рогатого скота. Содержит комплекс нуклеи­новых кислот и белковое вещество, обладающее активностью фермента рибонуклеазы. Применяется в таблетках по 0,5 г при гипертонической болезни.

Препараты желчи

Желчь медицинская консервированная (Choleconservata medicata) или билиарин (Biliarinum). Препарат, содержащий натуральную желчь убойного скота. Свежесобранную желчь или смесь свежесобранной желчи с желчью, извлеченной из желчных пузырей после их 3-суточной выдержки в холодильнике (в соотношении 3:1) фильтруют и на каж­дый литр профильтрованной желчи добавляют смесь стабилизаторов, антисептиков и отдушки в следующих количествах: спирта 96% 200 мл, формалина или лизоформа 2 мл, спиртового раствора фурацилина (1 г фурацилина в 1,5 л 70% спирта) 20 мл, душистой эссенции до 4 мл. Смесь тщательно взбалтывают, после 3-суточной выдержки при ком­натной температуре разливают в асептических условиях в стерильные флаконы по 250 мл и пастеризуют при температуре 60—63 °С в тече­ние 1'Д—1 '/г ч. Применяют в виде компрессов как обезболивающее и рассасывающее средство при хронических артритах, спондилоартрозе, тендовагинитах и др.

Препараты ферментов семенников и стекловидного тела

Лидаза (Lydasa). Препарат, содержащий фермент гиалуронидазу. Получается из семенников крупного рогатого скота. Светло-желтая или золотистого цвета пористая масса, легкорастворимая в воде. Спе­цифическим субстратом гиалуронидазы является гиалуроновая кисло­та, относящаяся к группе мукополисахаридов. Биологическое значение ее заключается в том, что она является «цементирующим», склеиваю­щим веществом соединительной ткани. Гиалуронидаза вызывает рас­пад гиалуроновой кислоты до глюкозамина и глюкуроновой кислоты и тем самым уменьшает ее вязкость, что вызывает увеличение проницае­мости тканей и облегчает движение жидкостей в межтканевых про­странствах. Выпускается в ампулах, содержащих по 0,1 г стерильного сухого вещества. Перед употреблением содержимое ампулы растворяют в 1 мл 0,5% раствора новокаина. Применяется внутримышечно или под кожу для размягчения рубцов, появления подвижности в суставах, устранения или уменьшения контрактур, рассасывания гематом.

Ронидаза (Ronidasa). Препарат гиалуронидазы. В отличие от лида-зы (специально очищенный препарат для парентерального применения) ронидаза используется для наружного применения. Порошок серовато-желтоватого цвета, выпускаемый во флаконах пенициллинового типа по 5 г. Порошок ронидазы (по 0,5 г и более) наносят на увлажненную изотоническим раствором хлорида натрия стерильную марлевую сал­фетку, которую накладывают на пораженный участок под вощеную бумагу и мягкую повязку.